[发明专利]一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗包括铁蛋白纳米颗粒载体蛋白、表面抗原和内腔抗原，所述表面抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的表面，内腔抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的内部空腔；

所述铁蛋白为去铁铁蛋白；

所述表面抗原为HA抗原和M2e抗原的组合；

所述内腔抗原为NP抗原；

所述通用流感疫苗的制备方法包括以下步骤：将表面抗原装载到铁蛋白纳米颗粒载体蛋白表面，将内腔抗原装载到铁蛋白纳米颗粒内部空腔；

所述表面抗原通过基因融合表达或化学偶联法分布于铁蛋白纳米颗粒载体蛋白表面；

所述内腔抗原装载的方法包括加热法、酸碱调节法或变性剂法；

所述铁蛋白纳米颗粒载体蛋白为全长铁蛋白纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述铁蛋白纳米颗粒载体蛋白为哺乳动物来源的铁蛋白或细菌来源的铁蛋白。

3.根据权利要求2所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述哺乳动物来源的铁蛋白为马脾脏铁蛋白。

4.根据权利要求2所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述细菌来源的铁蛋白为幽门螺杆菌铁蛋白。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述铁蛋白纳米颗粒载体蛋白的来源包括天然提取产物、人工合成产物或基因工程技术产物中的任一种或至少两种的组合。

6.根据权利要求5所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述化学偶联法的化学交联剂包括琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(SMCC)、磺基琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(Sulfo-SMCC)、琥珀酰亚胺基-马来酰亚胺多聚乙二醇(NHS-PEG_n-Mal)、N-ε-马来酰亚胺己酸琥珀酰亚胺酯(EMCS)、N-ε-马来酰亚胺己酸磺基琥珀酰亚胺酯(Sulfo-EMCS)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基硫代琥珀酰亚胺(Sulfo-NHS)、羧基-氨基多聚乙二醇(COOH-PEG_n-NH₂)、双琥珀酰亚胺辛二酸酯(DSS)、双磺基琥珀酰亚胺辛二酸酯(Sulfo-DSS)、磺基双琥珀酰亚胺酯多聚乙二醇(NHS-PEG_n-NHS)中的任一种或至少两种的组合。

7.根据权利要求6所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述化学偶联法的化学交联剂为Sulfo-SMCC或NHS-PEG_n-Mal交联剂；

其中，所述PEG_n中的n为聚乙二醇中乙二醇单体的个数，所述聚乙二醇的分子量范围为2k-10k。

8.如权利要求1-7中任一项所述的基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将表面抗原装载到铁蛋白纳米颗粒载体蛋白表面，将内腔抗原装载到铁蛋白纳米颗粒内部空腔；

所述表面抗原通过基因融合表达或化学偶联法分布于铁蛋白纳米颗粒载体蛋白表面；

所述内腔抗原装载的方法包括加热法、酸碱调节法或变性剂法。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(A1)将内腔抗原装载到铁蛋白纳米颗粒的内部空腔中；

(A2)将第一种表面抗原通过化学偶联法装载至步骤(A1)所得铁蛋白纳米颗粒载体蛋白表面；

(A3)通过化学偶联法在步骤(A2)所得铁蛋白纳米颗粒表面修饰第二种表面抗原，得基于铁蛋白的三抗原通用流感疫苗。