[发明专利]一种正相色谱法分离磷酸奥司他韦对映异构体的方法

说明书

本发明涉及正相色谱法分离磷酸奥司他韦及其对映异构体的高效液相色谱方法，该方法采用硅胶表面涂敷有纤维素‑三(3,5‑二氯苯基氨基甲酸酯)柱，流动相为正己烷‑无水乙醇‑甲醇‑三氟乙酸‑二乙胺体积比为(90:8:2:0.4:0.2)，柱温30℃~40℃，检测波长为240nm，流速为每分钟0.9~1.1ml。该方法能分离磷酸奥司他韦与磷酸奥司他韦对映异构体，且简单准确、灵敏度高，可用于磷酸奥司他韦生产中对映异构体的检测。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种正相色谱法分离磷酸奥司他韦对映异构体的方法。

背景技术

磷酸奥司他韦(seltamivir phosphate)，化学名为：(R，4R，5S)4-乙酰胺-5-胺基-3(-丙氧乙酯)1-环己烷-1羧酸乙酯磷酸盐，其化学结构式为：

磷酸奥司他韦，商品名达菲(AMIFLU)，由美国的Gilead Sciences Inc.(吉利德科学公司)1996年研制成功的用于预防或治疗禽流感的抗病毒化合物。该药物具有对流感病毒的靶点治疗特异高效、安全、耐药性小等特点，已在多国获批上市，是目前最有效的抗流感病毒药物，也是最常用的处方药物之一。

磷酸奥司他韦具有三个手性中心，所以有7个相对的手性异构体，其中磷酸奥司他韦的对映异构体（SSR-isomer）因其物理化学性质均与磷酸奥司他韦相近较难分离，从而影响最终药物的纯度和质量。因此，实现磷酸奥司他韦及其对映异构的分离和测定对磷酸奥司他韦的质量控制非常重要。目前，现有药典方法均未对磷酸奥司他韦对映异构体进行控制。现有文献“郭娜，几种手性药物的对映异构体分离方法与药物动力学研究[D]，沈阳药科大学，2008年”中有提到磷酸奥司他韦对映异构体的方法研究，但该方法流动相体系为正己烷与异丙醇，而磷酸奥司他韦在正己烷与异丙醇中几乎不溶，因此该方法实际并不能很好地实现磷酸奥司他韦与对映异构体的分离。此外，未见有关磷酸奥司他韦对映异构体分离的其他文献报道。磷酸奥司他韦作为一种常见的治疗流感药物，在日常生活中使用较频繁，为了保证药物研发和生产的质量，研究开发一种准确有效测定磷酸奥司他韦对映异构体的分析测定方法，对药物产品的质量控制具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简单准确，能同时有效分离测定磷酸奥司他韦及其对映异构体的方法。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种正相色谱法分离磷酸奥司他韦对映异构体的方法，包括如下步骤：

（1）高效液相色谱条件：

色谱柱：硅胶表面涂敷有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)柱(4.6mm×250mm，5μm)；

检测波长：240nm；

流速：0.9 ~1.1ml/min；

柱温：33~37℃；

进样量：25μl；

流动相：正己烷-无水乙醇-甲醇-三氟乙酸-二乙胺体积比为(90:7:3:0.4:0.2)~(90:9:1:0.4:0.2)

稀释剂：正己烷-无水乙醇-甲醇体积比为1:1:3

（2）制备系统适用性溶液；

（3）制备供试品溶液；

（4）测定方法：分别精密量取供试品溶液和系统适用性溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，按峰面积计算磷酸奥司他韦对映异构体及供试品含量。

所述磷酸奥司他韦与磷酸奥司他韦对映异构体结构分别如分子式I、分子式II所示：

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