[发明专利]一种从忧遁草中提取、分离纯化3种黄酮苷的方法

说明书

本发明涉及一种从忧遁草中提取、分离纯化3种黄酮苷的方法，以忧遁草为原料，经过下述步骤：（1）提取；（2）高效液相色谱分离分析；（3）大孔吸附树脂富集；（4）半制备型高效液相色谱分离纯化；（5）化合物的纯度检测及结构鉴定。用半制备型高效液相色谱进行分离纯化，流动相为甲醇‑水等度洗脱，得到3种高纯度的成分，经核磁共振波谱鉴定分别是肥皂草苷、夏佛塔苷和牡荆苷。本工艺过程绿色环保，对环境无严重危害，综合成本低。

技术领域

本发明属于化工领域，具体是涉及一种从忧遁草中提取、分离纯化3种黄酮苷的方法。

背景技术

忧遁草为爵床科(Acanthaceae)鳄嘴花属鳄嘴花Clinacanthus nutans(Burro.F.)Lindau的全草，别名有鳄嘴花、扭序花、青箭、沙巴蛇草、柔刺草、千里追、汉帝草等，广泛分布于我国南部至西南部，如海南、广东、广西、云南等地区，以及马来西亚、印度尼西亚、泰国等国家。忧遁草味甘、微苦，性凉，入肝、肾经，具有清热利湿、利尿消肿、活血疏经、抗肿瘤等功效。研究表明，忧遁草有良好的抗炎、抗菌、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、免疫调节等生物活性。忧遁草含有多种化学成分，如黄酮、三萜、植物甾醇、脱镁叶绿素、含硫化合物、氨基酸、微量元素、生物碱等，其中，黄酮类物质的含量最高。忧遁草中的黄酮主要是黄酮苷，有降血糖、防辐射、抗菌杀虫、抗病毒、保护肝脏及心脑血管等多种生理活性。为了更好地开发利用该药物资源，本发明提供了一种高效、快速、简便的从忧遁草中提取、分离纯化3种黄酮苷的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效、快速、简便的从忧遁草中提取、分离纯化3种黄酮苷的方法。

本发明的方案如下：

从忧遁草中提取、分离纯化3种黄酮苷的方法，其步骤为：

(1)黄酮苷的提取：将忧遁草粉碎，用有机溶剂进行提取，过滤，提取液经减压浓缩得粗提物。

(2)黄酮苷的分离分析：用分析型高效液相色谱仪对粗提物的组成进行分离分析，色谱柱为C₁₈柱(250×4.6mm I.D.,5μm)，流动相为甲醇-水(40：60，V/V)，流速为1.0mL/min，检测波长为330nm，柱温为室温。

(3)黄酮苷的富集：用HPD-100型大孔吸附树脂对粗提物中的黄酮苷进行富集，首先用水洗脱10个柱体积以除去强极性的杂质，再用40％乙醇-水溶液洗脱7个柱体积将黄酮苷洗脱下来。

(4)黄酮苷的分离纯化：用半制备型高效液相色谱仪对富集后的黄酮苷进行分离纯化，色谱柱为C₁₈柱(250×25.4mm I.D.,10μm)，流动相为甲醇-水(34：66，V/V)，流速为25mL/min，检测波长为330nm，柱温为室温。根据色谱图手动收集目标组分馏分，减压浓缩除去溶剂。

(5)化合物的纯度检测及结构鉴定：将每一个目标组分馏分减压浓缩后用甲醇溶解，其纯度用高效液相色谱法进行检测，色谱条件见步骤(2)，分析结果表明3种化合物的纯度都达到了95％以上。经核磁共振波谱分析3种化合物分别是肥皂草苷、夏佛塔苷和牡荆苷。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤(1)提取溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯和水(优选乙醇)。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤(1)提取溶剂(乙醇-水溶液)中乙醇的体积分数为10％-95％(优选75％)。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤(1)中提取方法为冷浸、超声和加热回流(优选超声)。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤(1)提取时溶剂的用量为10-25倍量(优选20倍量)。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤(1)提取时间为15-60分钟(优选30分钟)。