[发明专利]一种从东北岩高兰中提取、分离纯化5种查耳酮的方法

权利要求书

1.一种从东北岩高兰中提取、分离纯化5种查耳酮的方法,其特征是，步骤为：

（1）查耳酮的提取：将东北岩高兰全草粉碎，用有机溶剂进行提取，过滤，提取液经减压浓缩得粗提物；

（2）查耳酮的分离分析：用分析型高效液相色谱仪对粗提物的组成进行分离分析，色谱柱为C₁₈柱，250×4.6 mm I.D., 5μm，流动相为甲醇-水梯度洗脱，甲醇：0-25分钟，67%；25-35分钟，67%-90%，流速为1.0mL/min，检测波长为280 nm，柱温为室温；

（3）查耳酮的富集：用AB-8型大孔吸附树脂对粗提物中的查耳酮进行富集，首先用20%乙醇-水溶液洗脱5个柱体积以除去杂质，再用95%乙醇-水溶液洗脱5个柱体积将查耳酮洗脱下来；

（4）查耳酮的分离纯化：用半制备型高效液相色谱仪对富集后的查耳酮进行分离纯化，色谱柱为C₁₈柱，250×25.4 mm I.D., 10 μm，流动相为甲醇-水梯度洗脱，0-30分钟，65%甲醇；30-40分钟，85%甲醇，检测波长为280 nm，柱温为室温；根据色谱图手动收集目标组分馏分，减压浓缩除去溶剂；

（5）化合物的纯度检测及结构鉴定：将每一个目标组分馏分经减压浓缩后用甲醇溶解，其纯度用高效液相色谱法进行检测，色谱条件见步骤（2）；经核磁共振波谱分析5种化合物分别是：2’, 4’,β-三羟基二氢查耳酮、2’-甲氧基-4’-羟基二氢查耳酮、2’, 4’-二羟基二氢查耳酮、岩高兰素A及岩高兰素B。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）提取溶剂为甲醇、无水乙醇、乙酸乙酯或水。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）中提取方法为冷浸、超声或加热回流。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）提取时溶剂的用量为10-25倍量，提取时间为10-90分钟，提取次数为1-3次。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（4）洗脱液的流速为20-30mL/min。