[发明专利]一种新型环状三元适配体及其合成方法和应用

权利要求书

1.一种新型环状三元适配体，其特征在于，三条适配体单链携带有相互互补的碱基序列，所述的三条适配体单链通过各自携带的互补碱基配对后彼此连接形成环状，所述的三条适配体单链为同一种或两种及以上的适配体单链；所述适配体单链的核心序列为SE15-8或EPCAM-Apt，其核苷酸序列为SEQ No.1或SEQ No.5。

2.根据权利要求1所述的新型环状三元适配体，其特征在于，至少有一条所述适配体单链上修饰有标记分子和/或化学官能团。

3.根据权利要求2所述的新型环状三元适配体，其特征在于，所述标记分子为羧基四甲基罗丹明、生物素、地高辛、荧光物质、 纳米发光材料、聚乙二醇、肽段、蛋白、叶酸中的一种或两种及以上。

4.根据权利要求2所述的新型环状三元适配体，其特征在于，所述化学官能团为氨基、羧基、巯基、羟基、醛基和硝基中的一种或两种及以上。

5.根据权利要求2所述的新型环状三元适配体的合成方法，其特征在于，所述新型环状三元适配体通过化学官能团或物理嵌合方式装载药物，所述药物为焦脱镁叶绿酸-a、尿嘧啶、阿霉素、喜树碱、紫杉醇、多西紫杉醇、表柔比星、利妥昔单抗和曲妥珠单抗中的一种或两种及以上。

6.根据权利要求5所述的新型环状三元适配体，其特征在于，所述携带有互补碱基序列的三条适配体单链的核苷酸序列分别是SEQ No.2、SEQ No.3和SEQ No.4，或者是SEQ No.6、SEQ No.7和SEQ No.8。

7.根据权利要求6所述的新型环状三元适配体，其特征在于，每一组的三条所述适配体单链上至少有一条修饰有羧基荧光素基团和氨基，且5’端磷酸基团磷酸化。

8.根据权利要求1-7任意一项所述的新型环状三元适配体的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、根据所需要标记识别的一个或多个抗原，选择与抗原匹配的三条适配体单链，三条适配体单链为同一种或两种及以上的适配体单链；

S2、在目标适配体单链中引入特定碱基序列，使得第一适配体单链和第二适配体单链上分别带有一段与第三适配体互补的碱基序列，所引入的碱基序列不插入至三条适配体单链的活性部位；

S3、在DNA 连接酶缓冲液中加入等物质的量浓度的所述步骤S2中制备所得三种适配体单链，根据互补的碱基序列设定退火温度进行退火；将完成退火的混合溶液降至室温后，加入DNA连接酶于16℃进行反应，反应时间不低于1h，获得新型环状三元适配体。