[发明专利]一种表达羧肽酶G2的基因工程菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种表达羧肽酶G2的基因工程菌，其特征在于，在大肠杆菌（Escherichia coli）中同时表达SUMO蛋白标签和羧肽酶G2的基因工程菌，表达所述SUMO蛋白标签的SMT3基因位于表达所述羧肽酶G2的CPG2基因的上游；

所述的CPG2基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO: 1所示；

所述的SMT3基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO: 2所示。

2.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述的基因工程菌携带自5’端至3’端依次含有启动子、SMT3基因、CPG2基因和终止子的表达载体。

3.如权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述的表达载体的骨架为质粒pET-28a；

和/或，所述的启动子为T7启动子。

4.如权利要求1~3任一项所述的基因工程菌在制备羧肽酶G2中的应用。

5.一种如权利要求1~3任一项所述的基因工程菌的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括下列步骤：将SMT3基因、CPG2基因整合到大肠杆菌中，所述SMT3基因位于所述CPG2基因的上游。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括以下步骤：

（1）构建含有SMT3基因和CPG2基因的表达载体；

（2）以大肠杆菌为宿主菌株，用步骤（1）得到的表达载体进行转化，获得所述基因工程菌。

7.一种羧肽酶G2的制备方法，其特征在于，包括将如权利要求1~3任一项所述的基因工程菌发酵，从发酵液中获得羧肽酶G2。

8.一种表达载体，其特征在于，自5’端至3’端依次含有SMT3基因、CPG2基因；

所述的CPG2基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO: 1所示；

所述的SMT3基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO: 2所示。

9.如权利要求8所述的表达载体，其特征在于，所述的表达载体的骨架为质粒pET-28a。