[发明专利]一种用于筛选人前列腺癌肿瘤抗原表位肽的方法有效
| 申请号: | 201910244819.5 | 申请日: | 2019-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN109758590B | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
| 发明(设计)人: | 王华倩;林丹敏;何华锋;孙家杰;龙威;周晓琳;邓礼荣;卢宇靖;郑希 | 申请(专利权)人: | 广东工业大学 |
| 主分类号: | A61K49/00 | 分类号: | A61K49/00 |
| 代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 张春水;唐京桥 |
| 地址: | 510060 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 筛选 前列腺癌 肿瘤 抗原 表位肽 方法 | ||
1.一种用于筛选人前列腺癌肿瘤抗原表位肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:将表达人前列腺癌肿瘤抗原的全蛋白的重组质粒转染至鼠源前列腺癌细胞RM-1,得到表达人前列腺癌抗原的全蛋白的RM-1;所述质粒载体为pEF1-myc-his质粒,所述pEF1-myc-his质粒的启动子为人延伸因子1α-亚基启动子;所述人前列腺癌肿瘤抗原为PSMA;
步骤2:使用所述人前列腺癌肿瘤抗原的表位肽对小鼠进行滴鼻免疫处理,得到含有所述人前列腺癌肿瘤抗原的表位肽的第一处理小鼠;所述人前列腺癌肿瘤抗原的表位肽的接种量为0.001 μmoL/只~0.003 μmoL/只;
步骤3:将所述表达人前列腺癌肿瘤抗原的全蛋白的RM-1分别接种至所述第一处理小鼠和未接种所述人前列腺癌肿瘤抗原表位肽的第二处理小鼠中,得到第三处理小鼠和第四处理小鼠;所述表达人前列腺癌肿瘤抗原的全蛋白的RM-1的接种浓度为2.5×106 cell/mL~3.5×106 cell/mL;
所述第一处理小鼠接种表达人前列腺癌肿瘤抗原的全蛋白的RM-1的时间为小鼠最后一次接种所述人前列腺癌肿瘤抗原的表位肽的第10天;接种采用皮下注射的方式;接种完成后,培养第三处理小鼠和第四处理小鼠20天,测量肿瘤大小与质量;
步骤4:比较所述第三处理小鼠和所述第四处理小鼠的人前列腺癌肿瘤的大小,若所述第三处理小鼠的人前列腺癌肿瘤的质量小于所述第四处理小鼠人前列腺肿瘤的质量,则所述人前列腺癌肿瘤抗原表位肽具有抗人前列腺癌肿瘤免疫活性。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述小鼠的品系为C57BL/6J品系或Balb/c品系。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述重组质粒还包括:报告基因,所述报告基因为增强型绿色荧光蛋白EGFP、增强型黄色荧光蛋白EYFP或增强型青色荧光蛋白ECFP。
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