[发明专利]一种检测小分子物质的黑磷-金纳米粒子复合物光热定量免疫层析试纸条及其制备方法

说明书

本发明公开了一种检测小分子物质的黑磷‑金纳米粒子复合物光热定量免疫层析试纸条及其制备方法，包括以下步骤：(1)将氯金酸在黑磷表面还原为金纳米颗粒；(2)将待测物抗体吸附于黑磷‑金纳米颗粒复合物表面制备光热探针；(3)按顺序依次将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘贴于PVC背板上；(4)所述的硝酸纤维素膜上分别包被有待测物抗原构成的检测线和羊抗兔或鼠抗体构成的质控线；(5)将光热探针与待测样品混合后滴加于样品垫，通过毛细管作用向吸水垫层析，待测物抗原与待测物竞争结合光热探针；(6)通过808nm激光照射并利用红外温度计捕获温度。本发明具有特异性高、灵敏度好、操作简便及可实现定量检测的优点。

技术领域

本发明涉及一种小分子待测物光热定量免疫层析快速检测技术，特别是一种检测小分子物质的黑磷-金纳米粒子复合物光热定量免疫层析试纸条及其制备方法，属于免疫层析检测技术领域。

背景技术

光热转换试剂是一类能够有效地将光能转换为局部热能的材料或者化合物，因其良好的应用性能而越来越受到人们的关注，并在能源转换与储存、医学成像与治疗以及传感等领域得到了广泛的研究与应用。依靠光热转换试剂的作用产生局部高温，从而杀死癌细胞的肿瘤治疗方法被称为“光热疗法(photothermal therapy，PTT)”，这种新兴的肿瘤治疗方法受到了科学家们的青睐。近年来，大量的光热转换材料被合成，包括贵金属纳米颗粒、碳基材料、金属和非金属化合物、有机染料以及多种纳米复合材料。又因为近红外光源对生物组织具有较好的穿透性和对水较低的升温作用，因此，对近红外光源高响应的光热转换材料被广泛应用于生物医学领域的研究中。黑磷纳米片具有上述优异的光热性能。作为一种直接带隙半导体，其能带在0.3-1.8eV可随层数调整，因此，其具有良好的近红外(650-1400nm)激发响应。同时，利用黑磷纳米片的化学不稳定性，一些贵金属可在其表面还原形成纳米颗粒，加强其光热转换率的同时，提供更多抗体等生物材料的偶联位点。黑磷及黑磷-金属复合物依赖其较大的比表面积及卓越的光热性能是在生物医学及分析化学领域做出了巨大的贡献，如在光热治疗、药物输送，生物成像、生物诊断和生物传感器方面。然而，光热转换试剂在食品安全检测领域的应用却鲜有报道。

免疫层析试纸条具有操作简单、检测快速，成本低等优势，成为近年来备受关注的一种定性检测技术。同时，在实际检测过程中，短时间内就可得出检测结果的快速免疫层析检测技术更是因其不依赖复杂仪器、体积小巧、方便携带等优势成为最为合适的现场可视化快速食品安全检测工具。然而传统的基于光学信号的免疫层析试纸条在灵敏度或检测范围方面具有局限性。基于标记材料光热性能的热信号输出方式仅需通过廉价的激光器和红外温度计记录温度变化数值，在不借助其他读数仪器的情况下，即可通过简单的数学换算即可得到检测样品中待测物的浓度。将这一信号输出方式应用于免疫层析试纸条中，不仅克服了传统光学比色信号的分辨率差和背景干扰大的缺点，同时提高了试纸条检测灵敏度，为定量试纸条的发展提供了新的思路和良好的条件。同时，其化学不稳定性也可被用于作为还原剂在BP表面还原金属纳米颗粒以构建生物传感器。目前，以黑磷-金纳米颗粒复合物为探针的光热定量免疫层析试纸条还未见报道。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种以黑磷-金纳米粒子复合物为探针的小分子待测物光热定量免疫层析快速检测技术，为了实现上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种检测小分子物质的黑磷-金纳米粒子复合物光热定量免疫层析试纸条，包括样品垫、结合垫、包被光热探针的硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背板，其特征在于，在PVC背板上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述的硝酸纤维素膜上分别包被有由小分子抗原构成的检测线和二抗构成的质控线，两条线间隔距离为4-6mm；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫各交叠区的长度分别为0.8-1.3mm，试纸条宽3.0-4.0mm；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫各交叠区的长度分别为1mm。

本发明还公开了所述的试纸条的制备方法，包括以下步骤：