[发明专利]一种检测小分子物质的黑磷-金纳米粒子复合物光热定量免疫层析试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种检测小分子物质的黑磷-金纳米粒子复合物光热定量免疫层析试纸条，包括样品垫、结合垫、包被光热探针的硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背板，其特征在于，在PVC背板上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述的硝酸纤维素膜上分别包被有由小分子抗原构成的检测线和二抗构成的质控线，两条线间隔距离为4-6mm；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫各交叠区的长度分别为0.8-1.3mm，试纸条宽3.0-4.0mm；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫各交叠区的长度分别为1mm。

2.权利要求1所述的试纸条的制备方法，包括以下步骤：

(1)利用黑磷纳米片的化学不稳定性将氯金酸在黑磷表面还原为金纳米颗粒，得到黑磷-金纳米颗粒；

(2)利用金纳米颗粒的物理吸附性能将待测物抗体吸附于黑磷-金纳米颗粒复合物表面制备“黑磷-金纳米颗粒-待测物抗体”光热探针；

(3)按顺序依次将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘贴于PVC背板上；

所述的硝酸纤维素膜上分别包被有待测物抗原构成的检测线和羊抗兔或鼠抗体构成的质控线；将2.5μL光热探针与100μL待测样品混合后滴加于样品垫，通过毛细管作用向吸水垫层析，待测物抗原与待测物竞争结合光热探针。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，黑磷-金纳米颗粒的制备方法为：取5mL 200μg/mL黑鳞纳米片14000rpm离心15min后弃去上清，沉淀溶于20mL 0.3mmol/L柠檬酸钠水溶液中，搅拌中加入250μL 10mmol/L氯金酸溶液，5min后溶液由黄色变为紫黑色，形成BP-Au杂化纳米材料，浓度为50μg/m。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，黑磷-金纳米颗粒-待测物抗体光热探针的制备包括如下步骤：

(a)取400μL步骤(1)制备的黑磷-金纳米颗粒溶液，将4μL 0.65mg/mL待测物抗体加入到上述溶液中混合均匀，室温下静置1h；

(b)向步骤(a)得到的混合溶液中加入10μL 20％BSA及5μL 10％PEG-₂₀₀₀₀，混匀后室温下静置30min；

(c)将安道管配平，4℃条件下，12000rpm离心步骤(b)得到的溶液15min，弃去上清，溶液复溶至80μL0.5％BSA，0.5％PVP，1％Tween 20及0.5％PEG₂₀₀混合液中待用。

5.根据权利要求2所述的试纸条的制备方法，其特征在于，将用PBS溶液稀释后的羊抗兔或羊抗鼠抗体包被于硝酸纤维素膜上作为质控线，包被量分别为0.7μL/cm，37℃烘干，斩切为宽为3.7mm的试纸条，封装备用。