[发明专利]一种靶向肿瘤的超声造影剂

说明书

本发明公开了一种靶向肿瘤的超声造影剂。包括包裹多西他赛的聚赖氨酸高分子造影剂以及与之相连的凝溶胶蛋白单抗。本发明制备的靶向肿瘤的超声造影剂，包封率及载药量均较高，且缓释性能较好，造影剂靶向肝癌组织的特异性强，体外显影效果亦较好。为早期肝癌的诊断和辅助治疗开辟了新的思路。

技术领域

本发明属于超声造影剂技术领域，具体涉及一种定向靶向肝癌肿瘤的超声造影剂。

背景技术

肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，在恶性肿瘤死亡顺位中占第2位，在城市中仅次于肺癌；农村中仅次于胃癌。由于血清甲胎蛋白的临床应用和各种影像学技术的进步，特别是AFP和超声显像用于肝癌高危人群的监测，使肝癌能够在无症状和体征的亚临床期作出诊断，加之外科手术技术的成熟，以及各种局部治疗等非手术治疗方法的发展，使肝癌的预后较过去有了明显提高。

然而，目前常规影像学检查在肿瘤转移的预警及早期识别能力上具有明显的局限性。目前临床上广泛使用的超声造影剂属于血池显像，直径多在 2.5μm 以上而无法透过血管内皮间隙，对于低灌注区或无灌注区隐匿性微小转移病灶的检测敏感度及准确率仍然较低。因此，设计一种针对肝癌肿瘤抗原特异性显像的分子靶向造影剂，将为肝癌肿瘤转移的早期发现、精准诊断和精准治疗提供重要帮助。

发明内容

本发明的目的在于提供一种靶向肿瘤的超声造影剂，为肝癌肿瘤转移的早期发现、精准诊断和精准治疗提供重要帮助。

一种靶向肿瘤的超声造影剂，包括包裹多西他赛的聚赖氨酸高分子造影剂以及与之相连的凝溶胶蛋白单抗。

所述包裹多西他赛的聚赖氨酸高分子造影剂采用双乳化溶剂挥发法制成。

所述包裹多西他赛的聚赖氨酸高分子造影剂的制备方法为：

（1）称取 100mg 聚赖氨酸和10mg多西他赛，充分溶解于2ml二氯甲烷中，作为连续相，然后加入0.2ml双蒸水作为分散相，在-2-2℃条件下，声振仪声振，得乳白色的一次乳化液；

（2）加入 5ml 5%聚乙烯醇溶液，-2-2℃条件下，进行二次声振，得二次乳化液；

（3）向所得乳化液内加入15ml 3%异丙醇溶液，室温下磁力搅拌2-4h，使二氯甲烷充分挥发，微球表面固化，高速离心机7000-9000 转/分离心，收集造影剂，再以双蒸水重悬，反复离心洗涤收集微球，冷冻干燥24-48h 后充入氟碳气体，即得包裹多西他赛的聚赖氨酸高分子造影剂冻干粉，于4℃冰箱保存。

步骤（1）所述声振仪声振的参数为：95W，开5s关2s，共100s。

步骤（2）所述声振仪声振的参数为：80W，开3s关1s，共80s。

所述凝溶胶蛋白单抗与包裹多西他赛的聚赖氨酸高分子造影剂相连的方法为：

（1）将包裹多西他赛的聚赖氨酸高分子造影剂分散溶解于MES缓冲液中，加入耦联活化剂，室温下轨道式振荡器上振荡孵育35-50min，再以双蒸水6000-9000转/分反复洗涤离心，收集表面活化的造影剂；

（2）MES缓冲液重悬表面活化的造影剂，然后加入凝溶胶蛋白单抗，凝溶胶蛋白单抗终浓度为1.0-2.0m M，冰浴条件下振荡孵育1-2h，再以双蒸水 7000-8000转/分反复离心洗涤，收集微球，冷冻干燥 24-48h后充入氟碳气体得 冻干粉，于4℃冰箱保存。

所述耦联活化剂为EDC/NHS，EDC/NHS最终浓度比为3mM/4mM。

本发明的有益效果：本发明制备的靶向肿瘤的超声造影剂，包封率及载药量均较高，且缓释性能较好，造影剂靶向肝癌组织的特异性强，体外显影效果亦较好。为早期肝癌的诊断和辅助治疗开辟了新的思路。

附图说明

图1为肝癌常规超声造影。