[发明专利]一种金霉素残留分析的化学发光检测试剂盒及其制备方法在审
申请号: | 201910227564.1 | 申请日: | 2019-03-25 |
公开(公告)号: | CN111735940A | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 李冉;郭学波;李淑云;张懿;付博;战爽;何诗雨;祁喆;李海霞;陈晨;潘珊 | 申请(专利权)人: | 中元牧康(武汉)检测技术服务有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/531;G01N33/533;G01N33/543;G01N33/558;G01N33/577 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 徐瑛 |
地址: | 430070 湖北省武汉市东湖新技术开发*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 金霉素 残留 分析 化学 发光 检测 试剂盒 及其 制备 方法 | ||
1.一种金霉素残留分析的化学发光检测试剂盒,其特征在于,包括金霉素标准溶液、洗涤液、稀释缓冲液、偶联有金霉素抗体的磁微粒、镧族金属元素Eu标记的鼠抗金霉素单克隆抗体及兔抗金霉素多克隆抗体。
2.如权利要求1所述的一种金霉素残留分析的化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述磁微粒可直接与金霉素抗体偶联。
3.如权利要求1所述的一种金霉素残留分析的化学发光检测试剂盒,其特征在于,所述洗涤液由Tris和HCL构成弱碱性缓冲液,即Tris-HCL,pH7.2-7.6,浓度为0.030-0.065M,含有脂肪醇聚氧乙烯醚。
4.权利要求1-3任一项所述的一种金霉素残留分析的化学发光检测试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备镧族金属元素Eu标记的鼠抗金霉素单克隆抗体:用稀释缓冲液稀释所述鼠抗金霉素单克隆抗体并涂布与固相上,23-30℃孵育2h,孵育后,用洗涤液洗涤所述固相表面数次,生物素与镧族金属离子Eu的盐溶液混合,形成荧光性络合部分,用所述稀释缓冲液稀释络合的结合物后涂布与所述固相上,23-30℃条件下孵育2h,孵育后,用洗涤液洗涤所述固相表面数次,得到镧族金属元素Eu络合生物素形成的复合物标记的鼠抗金霉素单克隆抗体。
(2)制备试剂盒:在固相上结合兔抗金霉素多克隆抗体,用步骤(1)制备得到的鼠抗金霉素单克隆抗体作为二抗。
5.如权利要求4所述的一种金霉素残留分析的化学发光检测试剂盒的制备方法,其特征在于,步骤(1)中将所述镧系金属元素Eu络合生物素形成的复合物进行固相或液相的时间分辨荧光测定;测定条件为延迟时间为0.2~0.3ms,窗口时间为0.2~0.6ms,闪烁速度为0.6~1.2ms,激发波长为332nm,测定波长为615nm。
6.如权利要求4所述的一种金霉素残留分析的化学发光检测试剂盒的制备方法,其特征在于,所述稀释缓冲液包括牛血清白蛋白BSA和NaCL,其中,所述BSA的浓度为0.10%~0.15%,所述NaCL的浓度为1.5%~2.0%;所述稀释缓冲液的稀释倍数,即体液样本与缓冲液比例为1∶6~1∶12。
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