[发明专利]一种源于知母的β-葡萄糖苷酶、其编码基因、表达载体及其应用有效
| 申请号： | 201910216451.1 | 申请日： | 2019-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN109810965B | 公开（公告）日： | 2022-03-25 |
| 发明（设计）人： | 段礼新;刘中秋;王丽君;梁锦才;季爱加 | 申请（专利权）人： | 广州中医药大学（广州中医药研究院） |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/11;C12N15/70;C12N1/21;C12P33/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 颜希文;宋静娜 |
| 地址： | 510000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 源于 知母 葡萄 糖苷酶 编码 基因 表达 载体 及其 应用 | ||
1.一种蛋白，名为AaF26G1，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如序列SEQ ID NO：1所示。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因，其特征在于，其核苷酸序列为1）或2）：
1)如序列SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列；
2)与1）限定的核苷酸序列杂交，且编码序列SEQ ID NO：1所述蛋白的核苷酸序列。
3.用于扩增权利要求2所述编码基因的引物对，序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示。
4.含有权利要求2所述编码基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为pCold I-AaF26G1；所述重组表达载体pCold I-AaF26G1为将所述蛋白的编码基因插入质粒载体pCold I得到。
6.如权利要求4所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌为大肠杆菌。
7.如权利要求6所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌为大肠杆菌pGro7/BL21。
8.权利要求4所述的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在生产权利要求1所述蛋白中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述转基因细胞系或重组菌生产所述蛋白的生产方法为：将所述转基因细胞系或重组菌扩大培养后破碎，得到粗蛋白，或经纯化后可得到精蛋白。
10.权利要求1所述蛋白在特异催化呋甾皂苷C26位上的苷键水解并环化中的应用，其特征在于，所述蛋白为β-葡萄糖苷酶；所述呋甾皂苷环化后转化为螺甾皂苷。
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