[发明专利]GPC-LC-MS-MS法测定食品中工业染料的方法

说明书

本发明属于食品检测技术领域，特别公开了一种GPC‑LC‑MS‑MS法测定食品中工业染料的方法，其采用氨水‑乙腈溶液提取食品中苏丹红Ⅰ‑Ⅳ、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、碱性嫩黄和罗丹明B这9种工业染料，收集总上清液，再用GPC柱去除总上清液中的油脂和色素，最后上液相‑串联质谱仪进行测定。本发明的检测方法省去了对样品分开检测，提高了食品中工业染料检测的效率，具有良好的检测准确度。

技术领域

本发明属于食品检测技术领域，特别涉及GPC-LC-MS-MS法测定食品中工业染料的方法。

背景技术

色素可以分为天然色素和合成色素。天然色素着色力和耐光性较差，因此合成色素更受人们的青睐。根据《食品添加剂使用标准(GB 2760-2014)》，我国仅允许使用柠檬黄、胭脂红等11种合成色素。然而合成色素种类繁多，一些不法商家为了增强着色效果，在食品中添加我国明令禁止使用的工业染料，如苏丹红Ⅰ-Ⅳ、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、碱性嫩黄、罗丹明B等，这些违禁的工业染料经人体代谢后可生成萘胺等致癌性物质，长期摄入会对人体造成损害。

食品中违禁的工业染料的检测方法主要包括高效液相色谱法和高效液相色谱串联质谱法。目前，许多实验室以及检测机构在检测食品中的工业染料时，采用GB/T 19681-2005的标准测定食品中苏丹红染料，同时采用DB33/T 703-2008的标准测定食品中多种碱性工业染料，如此将样品分开进行检测，需要不断的调整实验参数和步骤，使得食品中工业染料的检测效率较低。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供GPC-LC-MS-MS法测定食品中工业染料的方法，其可以采用同一种的检测方法对食品中苏丹红Ⅰ-Ⅳ、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、碱性嫩黄和罗丹明B这9种工业染料加以测定，省去了将样品分开检测造成的麻烦，提高了食品中工业染料的检测效率。

为实现上述第一个目的，本发明提供了如下技术方案：

一种GPC-LC-MS-MS法测定食品中工业染料的方法，包括如下步骤：

①、样品前处理

a、称取2-5g样品于50mL离心管中，加入10-20mL氨水-乙腈溶液，漩涡振荡1min后，在超声波清洗器中超声提取10min，再放入冷冻高速离心机中以5000r/min离心10min，取上清液转移至鸡心瓶中；

b、在a中的离心管中再次加入10-20mL氨水-乙腈溶液，将离心管内的残渣和氨水-乙腈溶液漩涡振荡1min后，在超声波清洗器中超声提取10min，再放入冷冻高速离心机中以5000r/min离心10min，取上清液合并于a中的鸡心瓶中，得到总上清液；

②、GPC法净化

c、将b中得到的总上清液减压旋转蒸干至体积为5mL，环己烷-乙酸乙酯定容至10mL，滤膜过滤后上GPC柱，以环己烷和乙酸乙酯为流动相洗脱，收集洗脱液；

③、LC-MS-MS法测定

d、将步骤c收集的洗脱液转移至离心管中，在温度为40℃的氮吹仪上用氮气吹干，用甲酸-水溶液准确定容至1mL，滤膜过滤后得到待测液，上液相-串联质谱仪检测。

通过采用上述技术方案，当提取溶剂为纯有机试剂时，各物质的提取效率存在较大的差异，本发明采用氨水-乙腈溶液作为提取液，可有效提高苏丹红Ⅰ-Ⅳ、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、碱性嫩黄和罗丹明B这9种工业染料的提取效率，以便于对食品中工业染料的测定，省去了将上述9种工业染料分开检测所造成的麻烦，提高了食品工业染料检测的效率。

此外，本发明采用GPC去除食品中的油脂和色素，以达到净化的目的，保证检测的精确度，以此省去了现行标准中去脂肪及去色素的步骤，提高了食品中工业染料检测的效率，具有检测步骤简洁、操作方便的特点。