[发明专利]一种利用脐带血制备血清替代物的方法在审
| 申请号： | 201910198227.4 | 申请日： | 2019-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN110484498A | 公开（公告）日： | 2019-11-22 |
| 发明（设计）人： | 孔茹;王玉;于丽丽;赵钰婷 | 申请（专利权）人： | 山东省齐鲁干细胞工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 37218 济南泉城专利商标事务所 | 代理人： | 李桂存<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 250102 山东省济南市*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脐带血 全血 制备 血清替代物 血小板 血细胞层 凝血酶 浓缩 血小板释放 裂解产物 脐带血库 生理刺激 效果稳定 直接制备 上清液 保留 下层 原型 | ||
1.一种利用脐带血制备血清替代物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将脐带血进行全血浓缩，添加凝血酶，凝血酶原按照30-200IU/ml添加，剧烈颠倒混匀，放置0.5-12h，离心，保留上清液；
（2）对上步得到的上清液进行冻存处理，去掉细胞碎片，得到血清替代物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）脐带血全血浓缩的方法：1200-2000 g，离心5-20 min；离心后，上层为脐血浆，下层为红细胞和血小板等血细胞层，去掉上清，保留下层血细胞。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）去除细胞碎片的具体操作为：-20 ℃冻存24-48 h；37 ℃水浴融化后，1000-2000 g，22 ℃，离心操作，去除细胞碎片。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）得到的上清液再进行反复冻融，-80℃/37℃，1-3次。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）放置后，添加纤维蛋白原，然后再混匀，放置0.5-2h后再离心。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，纤维蛋白原添加方式为溶液添加，样本与纤维蛋白原溶液体积比为1：1-5，纤维蛋白原的含量为0.02%。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）的离心为500-800g。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，得到的血清替代物，经过0.22 um过滤除菌，去除杂质和细菌。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，得到的血清替代物，添加2-20U/ml 的肝素钠溶液，防止形成血小板凝胶。
10.一种权利要求1所述的血清替代物的应用方法：其特征在于：使用权利要求1-9所述制备方法制备完成的脐带血血清替代物，按照5 %-10 %的添加浓度培养间充质干细胞。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省齐鲁干细胞工程有限公司，未经山东省齐鲁干细胞工程有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910198227.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种血小板裂解液及其制备方法和应用
- 下一篇：一种脂肪干细胞的提取及培养方法
