[发明专利]一种阿片和神经肽FF受体的多靶点肽类分子及其制备和应用

权利要求书

1.一种阿片和神经肽FF受体的多靶点多肽，其结构通式如下：

Xaa₁-D-Ala-Gly-Xaa₂-Xaa₃-Pro-Gln-Arg-Phe-NH₂

其中Xaa₁为Tyr，Xaa₂为NMe-Phe，Xaa₃为Gln，序列为Tyr-D-Ala-Gly-NMe-Phe-Gln-Pro-Gln-Arg-Phe-NH₂。

2.据权利要求1所述阿片和神经肽FF受体的多靶点多肽的合成方法，包括以下工艺步骤：

. 多肽的合成

.树脂预处理：Rink-Amide-MBHA树脂在二氯甲烷中搅拌，使树脂充分溶胀后减压抽干溶剂；最后加入DMF洗涤；

.脱除Fmoc基团保护：在溶胀、抽干溶剂的树脂中，加入体积比为1:1:98的六氢吡啶、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯、DMF的混合溶液，搅拌反应5 min后抽干，重复3次；最后加入DMF洗涤，茚检，得到脱除Fmoc基团保护的树脂；

. 氨基酸的缩合：依次将N-α-Fmoc保护氨基酸Fmoc-AA-OH、N-羟基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲-六氟磷酸盐完全溶解于DMF中，再加入二异丙基乙胺后混匀得混合溶液；然后加到步骤.所得脱除Fmoc基团保护的树脂中，在氩气保护下搅拌反应60 min，抽干溶剂；用DMF重复洗涤、抽干，茚检后按步骤.的工艺脱除Fmoc基团保护，得到脱除Fmoc保护基团的肽树脂；

Fmoc-AA-OH与脱除Fmoc基团保护的树脂的摩尔量为1:2~1:5；

N-α-Fmoc保护氨基酸Fmoc-AA-OH、N-羟基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲-六氟磷酸盐及二异丙基乙胺的摩尔比为1:1:1:2；

.肽链的延长

根据多肽的结构设计，从C端开始依次选择N-α-Fmoc保护的氨基酸，并将步骤. 所得脱除Fmoc保护基团的树脂按步骤.的工艺完成肽链的缩合，得到侧链全保护的肽树脂；

.肽链从树脂上的切割：将步骤.iv所得肽树脂用DCM、MeOH交替洗涤，充分抽干溶剂后，加入切割剂，于室温下切割反应2~3小时；过滤，滤液在不高于37℃的条件下充分减压旋干，然后用不高于-10℃的乙醚析出沉淀；吸除上清液，加水充分溶解沉淀后将乙醚从水相中分离除去，水相通过冷冻干燥得到白色的粗肽固体粉末；

切割剂是由三氟乙酸、三异丙基硅烷、水以95 : 2.5 : 2.5的体积比混合形成的溶液；切割剂的加入量为每克肽树脂加入18ml的切割剂；

. 多肽的脱盐和纯化：以体积浓度15~20%乙酸溶液为流动相，过Sephadex G25交联葡聚糖凝胶柱；利用紫外检测仪收集主峰后冷冻干燥，得脱盐的肽化合物；再用反相高效液相色谱柱对脱盐的肽化合物进行分离纯化，经分离后收集样品主峰，得到多靶点多肽产品。

3.权利要求1所述阿片和神经肽FF受体的多靶点多肽在制备高效、低副作用镇痛药物中的应用。