[发明专利]一种利用芽块进行儿菜组织培养及繁殖的方法

权利要求书

1.一种利用芽块进行儿菜组织培养及繁殖的方法，其特征在于，用解剖刀切取优良株腋芽，每株取15-20个腋芽，装入一个尼龙网袋中并编号，经流水冲洗一夜后，放入加有洗洁精的水溶液中搅拌20分钟，脱水后用双蒸水冲洗3-5次；

在超净台中，将儿菜放入70％的酒精溶液中消毒30s，倒去酒精，用无菌水洗3次，再放入加有几滴吐温的2％的次氯酸钠溶液消毒20min，期间不断搅拌，倒掉溶液，用无菌水冲洗4～5遍，得到无菌的外植体；

以1/2MS、MS为基本培养基，所有培养基添加30g/L白砂糖，8g/L琼脂，激素浓度配比按培养阶段进行调整，调节pH＝5.8，在121℃高压灭菌20min；培养温度为25±2℃，每天光照12～14h，光照强度1500～2000Lx；

将腋芽切分成多个1cm³的小腋芽块，接种在预培养基1/2MS上进行培养；

接种在含有0.1mg·L^-1NAA和0.3mg·L^-16-BA的MS诱导培养基上；以培养30d后的不定芽为外植体，在MS增殖培养基上添加0.3mg·L^-16-BA和0.1mg·L^-1NAA，继代培养30d后选择壮苗接入生根培养基中；生根培养基以MS为基本培养基，添加0.1mg·L^-1NAA；

将获得的带根分生苗，进行2-3天的开瓶炼苗，清洗除去附在根上的培养基，移栽到温室大棚中。

2.如权利要求1所述的利用芽块进行儿菜组织培养及繁殖的方法，其特征在于，消毒后取出腋芽放在灭过菌的滤纸上，剥去表面1-2层叶片，从腋芽中部横向剖开，将腋芽切分成多个1cm³的小腋芽块，接种在预培养基1/2MS上进行培养；每个培养皿上接种8个外植体。

3.如权利要求1所述的利用芽块进行儿菜组织培养及繁殖的方法，其特征在于，预培养后，选择无污染的外植体，接种在含有0.1mg·L^-1NAA和0.3mg·L^-16-BA的MS诱导培养基上，每瓶接种5个外植体。

4.如权利要求1所述的利用芽块进行儿菜组织培养及繁殖的方法，其特征在于，以培养30d后的不定芽为外植体，在MS增殖培养基上添加0.3mg·L^-16-BA和0.1mg·L^-1NAA，每瓶接种4个外植体；继代培养30d后选择壮苗接入生根培养基中，其余小苗继续进行增殖培养。