[发明专利]一种聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法及基因载体

权利要求书

1.一种聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

在惰性气氛下，向米糠多糖铁溶液中依次加入三乙胺和N,N-羰基-二咪唑溶液，避光反应形成反应溶液；

将聚乙烯亚胺溶液加入到所述反应溶液中避光反应形成粗样液，并在反应过程中控制混合溶液呈碱性；

对所述粗样液进行透析，取透过液醇沉、冷冻干燥后得聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁。

2.如权利要求1所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，米糠多糖铁、N,N-羰基-二咪唑和聚乙烯亚胺的质量比为1：(2.0～3.0):(7.5～9.0)。

3.如权利要求1所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，所述在惰性气氛下，向米糠多糖铁溶液中依次加入三乙胺和N,N-羰基-二咪唑溶液，避光反应形成反应溶液的步骤中，

向米糠多糖铁溶液中加入三乙胺后米糠多糖铁溶液的pH为8～9；和/或，

所述避光反应时间为3～5h。

4.如权利要求1所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，所述将聚乙烯亚胺溶液加入到所述反应溶液中避光反应形成粗样液，并在反应过程中控制混合溶液呈碱性的步骤包括：

将聚乙烯亚胺溶液滴加到所述反应溶液中，同时向所述反应溶液中滴加三乙胺并控制pH为8.8～9.2，避光条件下搅拌反应，得粗样液；

所述将聚乙烯亚胺溶液滴加到所述反应溶液中的时间不超过1h；和/或，

所述搅拌反应的时间为22～26h。

5.如权利要求1所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，所述对所述粗样液进行透析，取透过液醇沉、冷冻干燥后得聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的步骤中，

所述透析时，使用的透析袋的截留分子量为3000～3200；

所述透析的时间为36～60h；和/或，

所述醇沉的时间为36～50h。

6.如权利要求1所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，所述在惰性气氛下，向米糠多糖铁溶液中依次加入三乙胺和N,N-羰基-二咪唑溶液，避光反应形成反应溶液的步骤之前，还包括：

将米糠多糖铁溶于有机溶剂中，得米糠多糖铁溶液；

将N,N-羰基-二咪唑溶于所述有机溶剂中，得N,N-羰基-二咪唑溶液；

将聚乙烯亚胺溶于所述有机溶剂中，得聚乙烯亚胺溶液。

7.如权利要求6所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为二甲基亚砜。

8.如权利要求6所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法，其特征在于，所述将米糠多糖铁溶于有机溶剂中，得米糠多糖铁溶液的步骤之前还包括：

将米糠多糖和柠檬酸三钠溶于水中，得混合溶液，并调节所述混合溶液的pH为8.5～9.0；

向所述混合溶液中滴加铁盐溶液至沉淀不再溶解后形成终点溶液，并在滴加过程中控制混合溶液pH在8.5～9.0范围内；

将所述终点溶液离心、醇沉、二次离心后，取沉淀物干燥得米糠多糖铁。

9.一种基因载体，其特征在于，包括根据权利要求1～8任一项所述的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法制备的聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁。