[发明专利]一种多子小瓜虫的传代培养方法

权利要求书

1.一种多子小瓜虫的传代培养方法，其特征在于包括以下步骤：

1)从患病鱼的体表以及鳃中分离出多子小瓜虫的滋养体，用无菌曝气水洗去附着的鱼体黏液后，选取细胞形态好、活力旺盛的滋养体作为原代细胞；

2)将选取的滋养体加入到无菌曝气水中，置于培养箱内，在15-30℃下恒温培养，当培养皿内掠食体全部孵出后，对其进行计数，然后按照掠食体与金鱼的数量比为10000-50000:1的比例将掠食体与健康金鱼在装有曝气水的养殖缸中进行同居感染，感染周期为0.5-3小时；

3)当养殖缸内的金鱼开始分泌大量粘液后，向养殖缸内加水，并充氧，然后将养殖缸置于培养箱内，在15-30℃下恒温培养，每天用重新平衡温度后的无菌曝气水对缸内的养殖水进行更换，及时清理死亡的金鱼，4-5天后，金鱼体表出现大量白点，将感染的金鱼按照步骤一所述方法分离出滋养体，即为第一代传代细胞。

4)将第一代传代细胞按照步骤2)到步骤3)的顺序操作，得到第二代传代细胞，依次类推，得到多代传代细胞。

2.如权利要求1所述多子小瓜虫的传代培养方法，其特征在于：步骤2)中所述的培养温度为21-25℃。

3.如权利要求1所述多子小瓜虫的传代培养方法，其特征在于：步骤2)中所述掠食体与金鱼的数量比为30000:1。

4.如权利要求1所述多子小瓜虫的传代培养方法，其特征在于：步骤2)中所述的感染周期为1.5小时。