[发明专利]一种鉴定桑叶是否经霜的检测方法

权利要求书

1.一种鉴定桑叶是否经霜的检测方法，其特征在于：通过下述差异性标志物的相对比值组合来判别：枸橼酸衍生物/绿原酸、桑皮苷F/绿原酸和色氨酸/绿原酸；所述比值是对待测样品进行高效液相色谱-质谱后的图谱的峰面积比值，且经霜前枸橼酸衍生物/绿原酸，桑皮苷F/绿原酸和色氨酸/绿原酸图谱的峰面积比值均低于0.3；而经霜后枸橼酸衍生物/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.8，桑皮苷F/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.6，且色氨酸/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.6；其中的标志物是通过非靶向植物代谢组学技术结合OPLS进行测定；

其中，所述桑叶在进行色谱之前进行前期处理：将桑叶或桑叶饮片粉碎，过筛，加水加热回流，冷却至室温，过滤备用；

采用的色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18，规格为250 mm×4.6 mm，5 μm；流动相：乙腈A -0.1%甲酸B ，梯度洗脱；检测波长320 nm；柱温30 ℃；流速1.0 mL·min-1；进样量10 μL；所述梯度洗脱为：0~10 min，5%~10%A；10~15 min，10%A；15~25 min，10%A~15%A；25~40min，15%A；40~45 min，15%~18%A；45~70 min，18%A；70~100 min，18%~100%A；100~108 min，100%A；108~116 min，5%A；

质谱条件采用电喷雾离子源；扫描级数5级；扫描范围：50～1000 m/z；扫描速度26000m/z·s-1；喷雾气压力35 psi；干燥气温度350 ℃；干燥气流速9 L·min-1；毛细管电压4000 V，分流比4∶1；

且所述枸橼酸衍生物、桑皮苷F、色氨酸的保留时间分别为6.448min、74.107min、45.428min。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：经霜前枸橼酸衍生物/绿原酸，桑皮苷F/绿原酸和色氨酸/绿原酸图谱的峰面积比值均低于0.15。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：经霜后枸橼酸衍生物/绿原酸图谱的峰面积比值均高于1.0，桑皮苷F/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.9，色氨酸/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.8。