[发明专利]红细胞脱核培养基及试剂盒

说明书

本发明涉及红细胞脱核领域，具体涉及一种红细胞脱核培养基及试剂盒。该红细胞脱核培养基包括：基础培养基、转铁蛋白、重组人胰岛素、肝素和Bcl‑2小分子抑制剂；可选地，还含有血浆、血清、谷氨酰胺或者促红细胞生成素中的至少一种。该试剂盒，用于红细胞的脱核培养，包括Bcl‑2小分子抑制剂。利用本发明提供的红细胞脱核培养基或者试剂盒制备成熟红细胞，能够显著提高红细胞的脱核率。

技术领域

本发明涉及红细胞脱核领域，具体涉及一种红细胞脱核培养基及试剂盒。

背景技术

在造血功能障碍、常规的贫血及休克治疗中，输血是一个关键的环节。虽然在发达国家有相对充足的血液供应，但是存在血源性病毒无法完全清除的问题。在发展中国家血液供应长期处于供不应求的状况，近年来，我国多个城市甚至出现“血荒”的说法。要解决血液来源匮乏的问题，开发新的血源已经成为当前医疗中的迫切需要。其中的一个途径就是通过自体或者是通过干细胞研究的相关手段产生红细胞，这包括脐带、成人骨髓、外周血来源的造血干/祖细胞及胚胎干细胞(human embryonic stem cells，hESC)、诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSC)。这些细胞都可以作为种子细胞，通过大量诱导扩增生成可用于移植的红细胞。这样不仅可以避免血源性病毒无法完全清除的问题，而且是一种新型的缓解供血不足的手段。

红细胞的成熟脱核对于输注医学应用意义重大，红细胞的脱核是红细胞成熟终末阶段发生的关键事件。生理条件下，细胞核的脱落是在成红细胞岛中进行的，并且该过程的发生与巨噬细胞密切相关。有研究报道，通过透射电子显微镜和扫描电镜的观察，发现巨噬细胞处于红细胞岛中央位置，周边环绕有即将脱核红细胞。进一步的研究表明，巨噬细胞表面有众多黏附分子，包括红细胞巨噬细胞蛋白、血管细胞黏附分子1、αv整合蛋白，红细胞表面也有α4β1整合蛋白和细胞间黏附分子4等蛋白质，这些蛋白质为二者的相互接触提供了条件。巨噬细胞不仅有锚定红细胞的功能，并且还可以吞噬红细胞成熟过程中脱出的细胞核。除此之外，巨噬细胞还可以通过胞吐作用分泌由自身合成的铁蛋白，从而促进红细胞的成熟、分化。虽然已经认识到一部分生理条件下红细胞是如何进行脱核的，但是目前对脱核机制研究并不明确，并且体外成熟红细胞的制备技术也仍待改进，特别是多种类型的干细胞诱导生成的成红细胞中脱核效率的提高。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种制备成熟红细胞的方法以及红细胞脱核培养基。