[发明专利]红细胞脱核培养基及试剂盒有效
申请号: | 201910151121.9 | 申请日: | 2019-02-28 |
公开(公告)号: | CN110093314B | 公开(公告)日: | 2021-06-15 |
发明(设计)人: | 裴雪涛;谢小燕;房芳;陈琳;曲洺逸 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院;华南生物医药研究院 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 赵天月 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红细胞 培养基 试剂盒 | ||
1.一种红细胞脱核培养基,其特征在于,包括:
基础培养基、转铁蛋白、重组人胰岛素、肝素和Bcl-2小分子抑制剂,
其中,所述Bcl-2小分子抑制剂为ABT-199或EM20-25。
2.根据权利要求1所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,所述红细胞脱核培养基还含有血浆、血清、谷氨酰胺或者促红细胞生成素中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,
所述转铁蛋白的浓度为50~500μg/ml;
所述重组人胰岛素的浓度为1~100μg/ml;
所述肝素的浓度为0.5~10U/ml;
所述谷氨酰胺的浓度为0~20mM;
所述血浆的体积浓度为0~10%;
所述血清的体积浓度为0~10%;
所述促红细胞生成素的浓度为0~20U/ml;
所述Bcl-2小分子抑制剂的浓度为0.1μM~100mM。
4.根据权利要求3所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,所述谷氨酰胺的浓度为2~10mM。
5.根据权利要求3所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,所述血浆的体积浓度为1~8%。
6.根据权利要求3所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,所述血清的体积浓度为1~8%。
7.根据权利要求3所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,所述促红细胞生成素的浓度为2~10U/ml。
8.根据权利要求2所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,
所述转铁蛋白的浓度为300μg/ml;
所述重组人胰岛素的浓度为10μg/ml;
所述肝素的浓度为3U/ml;
所述谷氨酰胺的浓度为3mM;
所述血浆的体积浓度为2%;
所述血清的体积浓度为3%;
所述Bcl-2小分子抑制剂的浓度为1μM~100μM。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的红细胞脱核培养基,其特征在于,所述基础培养基包括选自IMDM、F12、IPMI1640、stem span、stem span II、stemline II中的至少一种。
10.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒用于红细胞的脱核培养,所述试剂盒包括Bcl-2小分子抑制剂,其中,所述Bcl-2小分子抑制剂为ABT-199或EM20-25。
11.根据权利要求10所述的试剂盒,其特征在于,进一步包括下列中的至少一种:
基础培养基、转铁蛋白、重组人胰岛素、肝素、谷氨酰胺、血浆、血清和促红细胞生成素。
12.根据权利要求11所述的试剂盒,其特征在于,所述Bcl-2小分子抑制剂与所述基础培养基、转铁蛋白、重组人胰岛素、肝素、谷氨酰胺、血浆、血清和促红细胞生成素设置在不同的容器中。
13.根据权利要求11所述的试剂盒,其特征在于,所述基础培养基包括选自IMDM、F12、IPMI1640、stem span、stem span II、stemline II中的至少一种。
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