[发明专利]一种用于早期检测移植肾急性排异的代谢组合物、筛选方法及应用

说明书

本发明公开了一种用于早期检测移植肾急性排异的代谢组合物，由氨基蝶呤、蔗糖、雌酚酮、半乳糖肌醇、可的松、喹诺酮糖、乳糖、来苏糖、棕榈酸、邻苯二酚10种代谢物组合中的一种或多种组成；本发明还公开了一种代谢组合物的筛选方法；本发明筛选的得到的代谢物组合物中，氨基蝶呤、蔗糖、雌酚酮、半乳糖肌醇、可的松、喹诺酮糖、乳糖、来苏糖水平升高，棕榈酸、邻苯二酚水平降低对急性排异的诊断有指导意义；该代谢物组合物中，代谢物单独指示率为0.609～0.762，结合指示率达到0.792；该代谢物组合物中，核心成分为蔗糖、半乳糖肌醇、乳糖、来苏糖、喹诺酮糖，共同参与半乳糖代谢途径。

技术领域

本发明涉及一种用于早期检测移植肾急性排异的代谢组合物、筛选方法及应用。

背景技术

尿毒症是影响人类健康的重大疾病，肾移植是最有效的解决手段。自1954年成功开展第一例肾移植以来，60余年内全球已有近百万尿毒症患者接受肾移植手术，极大地改善了患者的生活质量。移植肾急性排斥反应(Acute Rejection，AR)是肾移植术后常见的并发症，可影响移植肾和患者的长期存活率。根据发病机制可分为细胞介导排斥反应(Cellular Mediated Rejection,CMR)和抗体介导排斥反应(Antibody MediatedRejection,AMR)两种类型。目前认为，急性排异发生的本质是细胞免疫应答，在异抗原刺激下T细胞发生活化，产生白介素IL-2并诱导致敏T细胞克隆增殖。急性排异多发生于移植后前3个月，移植后远期(5年以上)受者也会发生急性排异，但症状多不典型，若不能即时发现和处理可导致移植肾严重损害甚至失功[The impact of acute rejection in kidneytransplantation on long-term allograft and patient outcome.nephrourol,2015.7(1)]。

急性排异的发生多与免疫抑制剂用药调整有关。临床维持性免疫抑制方案通常包括钙调磷酸酶抑制剂(他克莫司或环孢素)、抗代谢药物(霉酚酸或硫唑嘌呤)和激素。免疫诱导方案采用抗胸腺球蛋白或者巴利昔单抗。钙调磷酸酶抑制剂不耐受患者药物调整为雷帕鸣素。目前不断有新型强效免疫抑制剂方案得到推广，在创新探索中急性排异的发生率显著下降，但是亚临床排异和临界改变的发生率未见明显降低，移植肾长期存活率未得到显著改善[Effect of histological damage on long-term kidney transplantoutcome.ransplantation,2001.71(4):p.515-23]。因此，急性排异的早期诊断是提高移植肾及患者长期存活率的关键措施，也是肾移植领域研究亟待解决的重要难题。

急性排异是多种生物学调控的复杂过程，很难利用单个生物标志物全面反映移植肾功能状态。需结合临床表现、肾功能检查、影像学检查及肾穿刺活检等进行诊断。典型的临床表现为移植肾肿胀、疼痛或伴发血尿，突发的不可解释的血压升高，发热，尿量减少和重量增加。血肌酐水平升高被认为是移植物功能障碍的常规标记。然而肌酐缺乏灵敏度和特异性，其升高水平与组织损伤程度并不一致，只有当急性排异严重到损耗肾功能时血肌酐才会升高，故而不能反映急性排异的早期阶段。从代谢与分布的生理学角度来看，血肌酐还受到其分布及分泌等综合作用的影响。尿量也是临床中检测肾功能的重要指标，但更易受到容量状态、药物等非肾脏因素影响。移植后早期尿量减少，可能为单纯性肾小管损伤，也有可能伴随急性排斥反应，处理措施截然不同。单纯性肾小管损伤，早期需要透析过度；若合并急性排斥反应，则需要调整抗排异治疗方案。目前诊断急性排异的金标准为移植肾穿刺活检，主要依据移植物内细胞的浸润情况作出判断。然而活检为有创性检查，可能出现肾包膜下血肿、血尿、动静脉瘘等并发症；穿刺点局部的病理情况往往不能反映肾脏的整体状态，难以动态监测移植肾的病理变化；取材的质量和病理诊断水平也影响临床应用价值。综上所述，我们亟需建立一种高特异性、无创性、早期诊断急性排异的方法。