[发明专利]一种基于Fmoc二肽的合成醋酸德舍瑞林的方法

权利要求书

1.一种基于Fmoc二肽的合成醋酸德舍瑞林的方法，其特征是：包括如下步骤：

第一步，合成H-Arg(pbf)-Pro-NHEt 片段

H-Pro-OH 与Boc酸酐反应后 经过浓缩，重结晶和干燥得Boc-Pro-OH，Boc-Pro-OH 和乙胺搅拌反应得H-Pro-NHEt ，再和Z-Arg(pbf)-OH用 DCC 缩合重结晶得Z-Arg(pbf)-Pro-NHEt，再氢化得H-Arg(pbf)-Pro-NHEt，见结构式I：

结构式I

第二步，合成Fmoc-Tyr（tBu）-D-Trp（Boc）-OH片段，

Fmoc-Tyr（tBu）-OH和H-D-Trp（Boc）-ome.Hcl通过DCC在THF中进行缩合反应，再用醋酸乙酯溶解，用水重结晶，蒸干醋酸乙酯，加入甲醇溶剂， 滴加NaOH 溶液，水解甲酯得Fmoc-Tyr（tBu）-D-Trp（Boc）-OH，结构式II：

结构式II

第三步，合成Fmoc-Trp（Boc）-Ser（tBu）-OH片段，

Fmoc-Trp（Boc）-OH和H-Ser（tBu）-ome.Hcl通过DCC在THF中进行缩合反应，再用醋酸乙酯溶解，用水重结晶，蒸干醋酸乙酯，加入甲醇溶剂， 滴加NaOH 溶液，水解甲酯得Fmoc-Trp（Boc）-Ser（tBu）-OH片段，

结构式III

第四步，合成德舍瑞林Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHEt

1）以取代度0.4-0.8mmol/g H-Leu-2-氯三苯甲基氯树脂为起始树脂，用DCM浸泡，使树脂充分溶胀，抽干，加入Fmoc-Tyr（tBu）-D-Trp（Boc）-OH，NMM，选用HBTU、TBTU或HATU中的一种与HOBT作为缩合剂,以DMF作为溶剂，反应1-2小时，用茚三酮法检测反应终点，用DMF洗涤3-5次，抽干，得Fmoc-Tyr（tBu）-D-Trp（Boc）-Leu-2-氯三苯甲基氯树脂，然后再加入体积比20%的哌啶/DMF的混合溶液脱帽试剂反应30分钟，用DMF洗涤5-6次，再依次偶联Fmoc-Trp（Boc）-Ser(tBu)-OH片段,Fmoc-His(Trt)-OH,Pyr,合成得到侧链全保护的肽链树脂Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Leu-2-氯三苯甲基氯树脂，并用DCM或乙醚抽干；

2) 把Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Leu-2-氯三苯甲基氯树脂加入到体积比1%-2%的TFA的DCM溶液中，或者体积比20%的三氟乙醇的DCM溶液中，或者三氟乙醇与醋酸与DCM按体积比1:2:7的混合液中，室温反应30分钟，过滤收集液体，再重复2次，减压蒸馏，加入乙醚析出并重结晶，得到全保护的Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Leu；

3）德舍瑞林全保护片段的合成

Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Leu和Arg(pbf)-Pro-NHEt按摩尔比（1-1.2）:1在DMF溶液中,加入缩合剂DIC,NMM,反应2-3h后，用茚三酮法检测反应终点，再用水和乙醚重结晶得到Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Leu-Arg(pbf)-Pro-NHEt的全保护片段；

4）把全保护的德舍瑞林H-Pyr-His（trt）-Trp（Boc）-Ser（tBu）-Tyr（tBu）-D-Trp（Boc）-Leu-Arg(pbf)-Pro-NHEt加入裂解试剂室温下反应2-3小时，室温下反应2-3小时，再加乙醚重结晶，去除侧链保护基团，得到德舍瑞林粗品肽：Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHEt。

2.根据权利要求1所述的一种基于Fmoc二肽的合成醋酸德舍瑞林的方法，其特征是：第一步中：H-Pro-NHEt与Z-arg(pbf)-OH 物料摩尔比为1:(0.9-1.2)。