[发明专利]检测细胞的组合物及检测方法

权利要求书

1.一种组合物，其特征在于包括：

多聚核苷酸，其5’端具有巯基；

金属银，其附着于所述的多聚核苷酸，形成多聚核苷酸-Ag纳米簇；

第一抗体，其与所述的多聚核苷酸结合，用于与目标细胞结合，将所述的多聚核苷酸-Ag纳米簇固定于所述的目标细胞上；

第二抗体，其偶联于磁性颗粒，用于与所述的目标细胞结合；

金属金纳米颗粒；

寡聚核苷酸，其于溶液中时，附着于金属金纳米颗粒表面；

HNO₃，其作用于所述的多聚核苷酸-Ag纳米簇，溶出Ag离子。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的多聚核苷酸其序列包括5'-SH-TATATAATTCCCACCCAC-3'。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的寡聚核苷酸为单链寡聚胞嘧啶。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的寡聚核苷酸序列包括5'-CCCCCCCCCCCC-3'。

5.根据权利要求1所述的组合物在检测间充质干细胞中的应用。

6.根据权利要求1所述的组合物在定性或定量检测间充质干细胞中的应用，其特征在于所述的第一抗体为CD44抗体，所述的第二抗体为CD90抗体。

7.一种检测细胞的方法，其特征在于包括：

将偶联第一抗体的多聚核苷酸-Ag纳米簇加入含有目标细胞的待测样本，于37℃±0.5℃反应1~2小时，使得多聚核苷酸-Ag纳米簇连接于目标细胞表面；

还加入偶联第二抗体的磁性颗粒，于25℃±0.5℃反应2~3小时，使得偶联第二抗体的磁性颗粒连接于目标细胞表面；

然后加入稀HNO₃以溶出银离子，于25℃±0.5℃反应2~3小时后，再加入金属金纳米颗粒与寡聚核苷酸混匀后，于波长400nm ~ 800nm的可见-紫外光谱下检测，采用在620nm和520nm处的紫外吸收值之比建立与目标细胞浓度的对应曲线，实现目标细胞进行定量检测。

8.根据权利要求7所述的检测细胞的方法，其特征在于所述的目标细胞为间充质干细胞时，细胞浓度的对数值与检测体系在620nm和520nm处的紫外吸收值之比之间呈良好的线性关系，线性方程为A620/A520=0.1347+0.118lgC_MSC，R²=0.993，检测限为2个细胞/mL。

9.根据权利要求7所述的检测细胞的方法，其特征在于所述的多聚核苷酸其序列包括5'-SH-TATATAATTCCCACCCAC-3'。

10.根据权利要求7所述的检测细胞的方法，其特征在于所述的寡聚核苷酸为单链寡聚胞嘧啶。

11.根据权利要求7所述的检测细胞的方法，其特征在于所述的寡聚核苷酸序列包括5'-CCCCCCCCCCCC-3'。