[发明专利]酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法

权利要求书

1.一种酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：它包括如下步骤：

S1.供试品溶液制备；

S2.竹节香附素A标准溶液制备；

S3.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液分别进行等度洗脱，建立酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定；

S4.对S3中建立的HPLC含量测定进行方法学考察；

S5.统计响应面法因素水平编码表；

S6.响应值结果及拟合模型数据统计；

S7.对步骤S6中数据进行多元回归拟合，得回归方程；

S8.求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得酒炙两头尖药材炮制工艺的最佳参数。

2.如权利要求1所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S1具体为：取不同条件下炮制的酒炙两头尖药材粉碎，过60目筛，精密称取1.0g置50ml锥形瓶中，加入70％乙醇溶液25ml，超声提取30min，过滤，过滤后形成的残渣加甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加甲醇至10ml，摇匀，即得供试品溶液。

3.如权利要求2所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S2具体为：精密称取竹节香附素A对照品10.24mg，置10ml的容量瓶中，加入甲醇至10ml，摇匀，得质量浓度为1.024mg·ml^-1的竹节香附素A标准溶液；精密吸取上述溶液0.25、0.5、1.25、2.5、5.0、10.0ml置10ml的容量瓶中，加入甲醇至10ml，摇匀，得不同浓度的竹节香附素A标准溶液。

4.如权利要求3所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S3具体为：

S31.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液进行洗脱，得酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定：以乙腈-0.1％甲酸水溶液(53:47)为流动相等度洗脱，流速1.0ml·min-1，柱温30℃，检测波长206nm，进样量10μL；

S32.在建立的液相色谱条件下，将供试品溶液和竹节香附素A标准溶液注入HPLC分析，得色谱图。

5.如权利要求4所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S4具体为：

S41.吸取上述S2中不同浓度的对照品溶液，按S31色谱条件进样分析，以峰面积值为纵坐标(Y)，以竹节香附素A质量浓度为横坐标(X)，得回归方程：Y＝336.16X-10.999，r＝0.999 9。

S42.对所建立的HPLC含量测定进行精密度、重复性、稳定性以及加样回收试验。

6.如权利要求5所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：以黄酒用量(A)、闷润温度(B)、炮制温度(C)及炮制时间(D)为考察因素，竹节香附素A的含量为响应指标，采用Design Expert 8.06软件的Box-Behnken响应面法试验设计的4因素3水平设计方案，统计响应面法因素水平编码表。

7.如权利要求6所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S6具体为：采用Box-Behnken中心组合试验设计原理，结合单因素试验结果，分析黄酒用量(A)、闷润温度(B)、炮制温度(C)及炮制时间(D)对竹节香附素A提取率的影响，得统计数据。

8.如权利要求7所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S7具体为：利用Design-Expert 8.0 Trial软件对步骤S6中统计数据进行多元回归拟合，得统计数据，统计数据经回归拟合后，得回归方程：

Y＝4.22+0.080A+0.095B+0.100C+0.059D+0.065AB-0.045AC-0.190AD+0.055BC-0.075BD-0.095CD-0.190A²-0.250B²-0.350C²-0.180D²。

9.如权利要求8所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S8具体为：运用Design Expert 8.06统计软件求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得到酒炮制两头尖的最佳工艺参数为：黄酒用量32.79％，浸润时间61.59min,炮制温度81.55℃，炮制时间43.85min。