[发明专利]检测生物胺的质谱分析方法

说明书

一种检测生物胺的质谱分析方法，适用于对待测物执行检测，所述待测物选自动物组织、酒类，及奶酪食品。所述质谱分析方法包含取样步骤、脱附步骤、游离步骤，及分析步骤，在所述取样步骤中，以探针由所述待测物上取得含有生物胺成分的样品，在所述脱附步骤中，对所述样品进行脱附，使所述样品在脱附后产生多个中性气相待测分子，在所述游离步骤中，利用多个带电反应物种与所述中性气相待测分子进行离子‑分子反应，并形成多个可供质谱仪分析的游离化粒子，在所述分析步骤中，利用所述质谱仪分析所述游离化粒子，以检测所述待测物中的生物胺。

技术领域

本发明涉及一种检测方法，特别是涉及一种检测样品中生物胺的质谱分析方法。

背景技术

生物胺(Biogenic amines,简称BAs)是存在于生物体中的碱性含氮化合物，其可通过不同机制产生。在低浓度时，生物胺能有效调节生物体的生理代谢功能，是维系生命不可或缺的生化分子，但在高浓度下时却会造成偏头痛、胃肠不适及假性过敏反应，对于体质敏感者来说，情况严重时甚至会休克或死亡。

生物胺在不同领域的检测技术中皆具有其重要性，例如在评估食品新鲜度时，检测生物胺在海鲜中的浓度是评估海鲜新鲜度的重要指标，其主要有两种检测方式，其中一种是以生物胺中的腐胺(Putrescine)、尸胺(Cadaverine)、组织胺(Histamine)及酪胺(Tyramine)的浓度总和来判断(前述成分被合称为生物胺指数)，当生物胺指数越高则表示海鲜的质量越差，而在大于50mg/kg时，便会被判断为腐败。另一种方式是比较亚精胺(Spermidine)与精胺(Spermine)浓度的比值，当比值大于0.7时，其新鲜度便属劣质。酒类及奶酪等食品在制造的过程中，各式胺基酸会转变生成组织胺等生物胺，因此检测上述食品中的生物胺含量对食品安全而言极为重要。而在刑事鉴定上，尸体上的生物标记物有助于了解人类遗体的死亡时间，这些生物标记物也包含了生物胺，也就是说，透过生物胺可协助判断尸体的死亡时间。

传统的生物胺检测方法有康威式微量扩散法、紫外光及荧光检测法等等。康威式微量扩散法是早期最广泛使用的检测方法，其是将检体溶液与碱性溶液混合，由于生物腐败后会产生挥发性胺类(如二甲胺及三甲胺)及氨气，因此释放出的含氮物质会从混合液中释放出，并在挥发后被硼酸溶液所吸收，最后再以酸滴定，以计算其中的挥发性含氮物质总量(The total volatile basic nitrogen，简称TVBN)，如此便可测得挥发性胺类的浓度以判断海鲜的新鲜度。此种方式虽然操作简单且器材易取得，但仅限于侦测具挥发性的含氮物质，无法侦测组织胺等重要却不具挥发性的生物胺，故成效有限，且滴定所造成的实验误差较大，造成精确度不高的问题。

而紫外光及荧光检测法是以高效能液相层析(High Performance LiquidChromatography，简称HPLC)搭配紫外光或荧光检测器为主，此方法须先经复杂的前处理，包括样品均质化、萃取、过滤、衍生化等等，且为了提高检测的灵敏度，需仰赖HPLC将基质与生物胺分离，才能得到较佳的讯号峰值，因此样品由前处理到完成HPLC分析往往得花费数小时，程序繁复且冗长。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可快速检测生物胺的质谱分析方法。

本发明检测生物胺的质谱分析方法，适用于对待测物执行检测，所述待测物选自动物组织、酒类，及奶酪食品其中的一种；所述检测生物胺的质谱分析方法包含取样步骤、脱附步骤、游离步骤，及分析步骤，在所述取样步骤中，以探针由所述待测物上取得含有生物胺成分的样品，在所述脱附步骤中，利用脱附装置对所述样品进行脱附，使所述样品在脱附后产生多个中性气相待测分子，在所述游离步骤中，利用游离装置所产生的多个带电反应物种与所述中性气相待测分子进行离子-分子反应，并形成多个可供质谱仪分析的游离化粒子，在所述分析步骤中，利用所述质谱仪分析所述游离化粒子，以检测所述待测物上的生物胺。

较佳地，前述检测生物胺的质谱分析方法，其中在所述取样步骤中，所述探针适用于以刮取方式在所述待测物上取得所述样品。