[发明专利]一种昆虫肠道微生物DNA的提取方法有效
| 申请号： | 201910105179.X | 申请日： | 2019-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN109852608B | 公开（公告）日： | 2021-05-07 |
| 发明（设计）人： | 邓盾;马现永;陈卫东;鲁慧杰;刘志昌;容庭 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院动物科学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 颜希文;宋静娜 |
| 地址： | 510000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 昆虫 肠道 微生物 dna 提取 方法 | ||
1.一种昆虫肠道微生物DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用乙醇清洗昆虫幼虫体表，再使用无菌水进行清洗；
(2)将步骤(1)处理好的昆虫幼虫，用呕吐剂和无菌水进行处理，使得昆虫幼虫呕吐获得其肠道内容物；
(3)将步骤(2)所得肠道内容物进行离心，并收集含有肠道微生物群的沉淀；
(4)使用试剂盒对步骤(3)所得沉淀进行DNA提取，即获得所述DNA；
(5)对步骤(4)所得的DNA进行浓度和纯度检测；
所述呕吐剂为吐温-20，所述吐温-20的浓度为0.1％。
2.根据权利要求1所述的昆虫肠道微生物DNA的提取方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述肠道内容物的离心速度为600～12000rpm/min，离心时间为5min。
3.根据权利要求1所述的昆虫肠道微生物DNA的提取方法，其特征在于，所述昆虫选自双翅目、鞘翅目、鳞翅目、同翅目、直翅目、蜚蠊目、膜翅目和半翅目昆虫中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的昆虫肠道微生物DNA的提取方法，其特征在于，所述昆虫选自双翅目和鞘翅目昆虫中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的昆虫肠道微生物DNA的提取方法，其特征在于，所述昆虫为黑水虻幼虫和大麦虫。
6.根据权利要求1所述的昆虫肠道微生物DNA的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中，使用所述无菌水进行清洗3～6次；所述步骤(2)中，所述无菌水的加入量为50～100ml。
7.根据权利要求1所述的昆虫肠道微生物DNA的提取方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述试剂盒为Qiagen试剂盒。
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