[发明专利]一种基于顶端分生组织转分化的林木芽再生方法有效
申请号: | 201910101703.6 | 申请日: | 2019-01-31 |
公开(公告)号: | CN109744148B | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
发明(设计)人: | 桑亚林;张宪省;程志娟;费芳芳;左芸;孟文静 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人: | 薛鹏喜 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 外植体 林木 顶端分生组织 细胞分裂素 再生芽 再生 生长素 转入 愈伤组织阶段 分化 分生组织 科学问题 离体快繁 实验体系 细胞命运 研究植物 遗传转化 愈伤组织 再生能力 再生体系 直接形成 组培苗 生物技术 物种 | ||
1.一种基于顶端分生组织转分化的林木芽再生方法,其特征在于,所述林木芽再生方法是由侧根原基中的根端分生组织直接转分化形成茎端分生组织,不经过愈伤组织诱导和培养阶段,包括以下步骤:
(1)取林木组培苗的根为外植体,将外植体在含有生长素NAA的B5培养基中培养20-26h;
(2)将步骤(1)培养后的外植体转入含有细胞分裂素2-IP的B5培养基中培养10-14天;
(3)将步骤(2)培养后的外植体转入含有细胞分裂素6-BA的MS培养基中培养14-18天,获得再生芽;
所述林木为杨树;
步骤(1)中,所述B5培养基中,生长素NAA的浓度为2-14μM;
步骤(2)中,所述B5培养基中,细胞分裂素2-IP的浓度为2.8-10.8μM;
步骤(3)中,所述MS培养基中,细胞分裂素6-BA的浓度为0.1-1.0mg/L。
2.根据权利要求1所述的林木芽再生方法,其特征在于,步骤(1)中,取林木组培苗的根,从根的近端起截取长度为2-4cm的根段作为外植体。
3.根据权利要求2所述的林木芽再生方法,其特征在于,从根的近端起截取长度为2cm的根段作为外植体。
4.根据权利要求1所述的林木芽再生方法,其特征在于,步骤(1)中,所述B5培养基中,生长素NAA的浓度为10μM。
5.根据权利要求1所述的林木芽再生方法,其特征在于,步骤(2)中,所述B5培养基中,细胞分裂素2-IP的浓度为8.8μM。
6.根据权利要求1所述的林木芽再生方法,其特征在于,步骤(3)中,所述MS培养基中,细胞分裂素6-BA的浓度为0.5 mg/L。
7.权利要1-6任一项所述的林木芽再生方法在如下a)-d)至少一项中的应用;
a)难以形成具有再生能力愈伤组织的林木的离体繁殖;
b)高产优质林木栽培体系的建立;
c)林木优良品系的种质保存;
d) 用于研究植物细胞命运决定、谱系转变的实验体系的建立;
所述林木为杨树。
8.一种林木再生植株的获得方法,其特征在于,包括以下步骤:
利用权利要1-6任一项所述的林木芽再生方法获得芽,再将芽进行壮苗培养、生根培养、炼苗和移栽,即获得林木再生植株;
所述林木为杨树。
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