[发明专利]一种DC-CIK细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法

说明书

本发明公开了一种DC‑CIK细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法，将内装采用统一标准配制的调制CIK细胞因子激活液IL2的试剂瓶、调制CIK细胞因子激活液CD3的试剂瓶、调制CIK细胞因子激活液IFN‑γ的试剂瓶、调制DC细胞因子激活液IL‑4和GM‑CSF混合液的试剂瓶、调制DC细胞因子激活液TNF‑α的试剂瓶、无血清培养液的试剂瓶的六个容器一同放入一个试剂盒内，在培养DC‑CIK细胞时无需另行配置培养基和诱导因子，缩短了培养细胞的时间，统一配置试剂，降低了培养过程中染菌的风险，同时使用方便，节省人力，可以在较短的时间内培养出质量均一的CIK细胞。

技术领域

本发明涉及试剂盒或试剂箱技术领域，具体涉及一种DC-CIK细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法。

背景技术

恶性肿瘤是威胁人类生存和健康的几大主要病因之一。肿瘤三大治疗手段：手术治疗、放射治疗、化学治疗。肿瘤患者术后化疗或者放疗可提高无病进展生存时间(progression-free survival，PFS)与总生存时间(overall survival，OS)，但总体疗效仍有限，所以更加需要寻求综合抗肿瘤治疗途径，以延长肿瘤患者的生存期。

肿瘤生物治疗被认为是一种新兴的、具有显著疗效的肿瘤治疗模式，是一种自身免疫抗癌的新型治疗方法。生物免疫疗法是通过从体外补充、诱导或活化机体内本来固有的生物应答调节系统，活化和调动具有细胞毒活性的生物活性细胞和细胞因子，以调整各种免疫杀伤性的生物反应。目前在免疫治疗方面研究应用较多的有淋巴因子激活的杀伤细胞、肿瘤浸润淋巴细胞、细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer，CIK)细胞、树突状细胞(Dendritic cells，DC)、共培养免疫(DC-CIK)细胞、自然杀伤细胞型的淋巴细胞，其中DC和CIK细胞是肿瘤免疫治疗的两个重要部分。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkiller cell，CIK)是一种新型的免疫活性细胞，它是将人外周血单个核细胞在体外用多种因子(抗CD3抗体、IL-2、IFN-γ等)诱导扩增一段时间后，获得的一群异质性细胞，具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和非主要组织相容性复盒体(majorhistocompatibility complex，MHC)限制性杀瘤的优点。而树突状细胞(dendritic cell，DC)是人体内功能最强大的抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC)，DC是目前发现的功能最强的抗原呈递细胞，表面具有丰富的有助于抗原呈递的分子，如主要组织相容性复盒体Ⅰ、Ⅱ，共刺激分子B7-1、B7-2，细胞黏附分子1、3以及淋巴细胞功能相关抗原1、3等，能有效激活初始T细胞，引发机体长生抗肿瘤免疫反应。

近年来随着对DC和CIK抗肿瘤的研究深入，临床应用发现单独应用DC、CIK细胞治疗肿瘤效果并不是很理想，肿瘤细胞对这些免疫效应细胞发生抵抗导致过继免疫疗效不佳，但将两者联合使用会表现出协同作用，所以临床目前将DC-CIK共培养使用，但在培养过程中采用的试剂较多，标准不一致，培养过程中的工作量大，培养时间长，染菌风险大，使许多研究人员很难在短时间内培养出质量均一的DC-CIK细胞。

因此，有必要设计一种新的DC-CIK细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法，以克服上述缺陷。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种DC-CIK细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法，在短时间内能够培养出质量均一的DC-CIK细胞。

本发明的目之一在于提供一种DC-CIK细胞诱导活化的试剂盒，包含盒盖和盒体，该盒体内部设有一个海绵托，该海绵拖上设有六个固定孔，该六个固定孔内分别放置有内容调制CIK细胞因子激活液IL-2的试剂瓶、内容调制CIK细胞因子激活液CD3的试剂瓶、内容调制CIK细胞因子激活液IFN-γ的试剂瓶、内容调制DC细胞因子激活液IL-4和GM-CSF混合液的试剂瓶、内容调制DC细胞因子激活液TNF-α的试剂瓶、内容无血清培养液的试剂瓶。