[发明专利]一种同时测定雷公藤中4种有效成分含量的方法

说明书

本发明公开了一种同时测定雷公藤中4种有效成分含量的方法，本发明对对雷公藤中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素和雷公藤酯甲的含量测定，所述方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为雷公藤藤药材质量控制和评价提供依据，并为药材最佳产地的确定奠定基础。并研究不同产地雷公藤药材中4种有效成分的含量差异。有助于在生产上确定药材适宜生长区，指导药材采收。

技术领域

本发明涉及一种同时测定雷公藤中4种有效成分含量的方法，属于药品技术的领域。

背景技术

雷公藤药材系卫矛科雷公藤属植物的根，主产于浙江，湖南，江西、安徽、 贵州等地，具有抗炎，抗菌，免疫调节等多种药理作用，用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑 狼疮等，临床应用广泛。雷公藤药材中主要活性成分为二萜内酯类，生物碱类及三萜类化合物， 但其主要活性成分同时又是毒性成分，不良反应时有报道。目前，对于雷公藤药材的评价多集中 于对主要有效成分雷公藤甲素的含量测定，但单一化学成分不能较全面反映药材质量，虽然有部 分人对雷公藤药材进行了HPLC指纹图谱的研究，但并未对药材中各个有效成分进行准确的定 量。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种同时测定雷公藤中4种有效成分含量的方法。本发明对对雷公 藤中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素和雷公藤酯甲的含量测定，所述方法准确，灵敏度 高，重复性好，结果可靠，为雷公藤藤药材质量控制和评价提供依据，并为药材最佳产地的确定 奠定基础。并研究不同产地雷公藤药材中4种有效成分的含量差异。有助于在生产上确定药材适 宜生长区，指导药材采收。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案实现：一种同时测定雷公藤中4种有效成分 含量的方法，是同时对雷公藤中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素和雷公藤酯甲的含量测 定，具体含量测定方法包括：

混合对照品溶液的制备：

①精密称取对照品雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素、雷公藤酯甲，分别加入甲醇溶 解，摇匀，得各对照品储备液；

②精密量取各对照品储备液1mL于10mL容量瓶中，加甲醇并定容至刻度，混合，摇匀， 精密量取1mL混合液，稀释成10mL，制备成混合对照品溶液；

供试品溶液的制备：

①称取干燥粉碎后的雷公藤药材，加乙醇回流提取两次，过滤，合并滤液，浓缩至无乙醇味， 干燥至恒重；

②精密称取干燥后的残渣于锥形瓶中，加入乙酸乙酯，超声处理，过滤，用乙酸乙酯分次洗 涤锥形瓶和漏斗，合并滤液及洗液，旋转蒸发仪回收溶剂，残渣用乙酸乙酯溶解，经过中性氧化 铝柱，用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，回收溶剂；

③步骤②中残渣用甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，定容至刻度，摇匀，经0.45μm滤膜 滤过，取续滤液，即得各供试品溶液；

色谱条件：色谱柱：Thermo Hypersil GOLD Phenyl Dim，250mm×4.6 mm，5μm；流动相A：0.1％磷酸溶液-0.2％三乙胺溶液；流动相B：乙腈，梯度洗脱；检 测波长：0～65min为225nm，65min时切换为210nm；流速：0.75mL/min；柱温：25℃； 进样量：10μL；

测定方法：分别精密吸取混合对照品溶液与供试品溶液，在上述色谱条件下，分别测量雷公 藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素、雷公藤酯甲的面积，计算，即得。

前述的同时测定雷公藤中4种有效成分含量的方法中，所述混合对照品溶液的制备是：

①精密称取对照品雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素、雷公藤酯甲，分别置于10mL 容量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得各对照品储备液；