[发明专利]一种鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法

权利要求书

1.一种鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）样品处理

分别称取血浆以及肝脏、肾脏、鳃、肠、皮肤、肌肉组织的样品，依次加入提取剂A和净化剂B，涡旋振荡后离心，收集提取液，用提取剂A重复提取样品残渣，合并提取液，氮气吹干后用甲醇定容，经0.22µm的滤膜过滤，滤液供UPLC-Q-TOFMS检测；

所述的提取剂A为乙腈和乙酸乙酯以体积比5：1混合；

所述的净化剂为无水硫酸镁和十八烷基硅烷键合硅胶以质量比10:1混合；

（2）UPLC-QTOFMS定性分析

利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间高分辨率质谱技术检测各组织样品，测得化合物的保留时间和离子质量，与辛硫磷、O,O,O^’,O^’,-四乙基二硫逐磷酸酯和O,O-二乙基硫代磷酸的保留时间和离子质量进行比对，判断各组织样品的代谢产物；

UHPLC分析条件具体为：C18色谱柱，100 mm×2.1 mm×1.8 µm；柱温：30 ℃，流速：0.25mL/min；流动相：有机相为甲醇，水相为0.1%甲酸水溶液，梯度洗脱程序：起始梯度有机相为10%的甲醇和水相为90%的0.1%甲酸水溶液，维持1 min，然后在5 min内有机相线性上升到体积浓度为90%的甲醇，水相线性下降为10%的0.1%甲酸水溶液，维持4 min，0.1 min内有机相体积线性下降到10%的甲醇，水相体积线性上升到90%，最后维持1.9 min；进样体积为5.0µL；

QTOFMS分析条件具体为：电喷雾离子源，正离子模式，扫描范围为M/Z 100～1000 Da，积累时间0.199957 secs；飞行时间质谱扫描的产物离子质量范围为50～1000 Da，去簇电压：45 V，碰撞能量为35 eV，扩展碰撞能量为15.0 eV；离子释放延迟为67 ，离子释放宽度为25，离子源：双喷雾离子源，喷雾气为50 Psi，辅助加热气为55 Psi，气窗气为25 Psi，离子化温度为400 ℃，正离子喷雾电压 5500 V。