[发明专利]一种A型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种A型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒，属于生物检测技术领域。本发明提供的试剂盒包括包被酶标板、洗涤液、样品稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液、标准阳性血清和标准阴性血清，所述包被酶标板以A型口蹄疫病毒为包被抗原，所述包被抗原的包被浓度为1.5～3μg/mL。本发明提供的试剂盒能用于检测A型口蹄疫病毒抗体，通过颜色变化来判定结果，具有高效、灵敏度高、特异性强、重复性好的优点。本发明提供的试剂盒操作简便、快速、成本低廉，可在室温(20～22℃)下可视化检测，适合于在临床应用中进行推广，为A型口蹄疫病毒抗体的快速检测提供可靠的技术手段。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种A型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用。

背景技术

口蹄疫是一种由口蹄疫病毒(FMDV)所致的急性的、热性的、高度接触性传染病，主要侵害偶蹄兽，经常在羊、牛、猪等动物中传播。发病时易感动物的唇和蹄部出现水疱，同时伴有发烧、食欲不振等症状，患病动物体重和产奶量大幅下降。口蹄疫病毒易通过空气传播，传染性强，流行快速，易感动物在抵抗力较弱的情况下也会导致死亡，给养殖户造成巨大的经济损失，严重阻碍了养殖业的发展。

目前对于A型口蹄疫病毒抗体的诊断方法和疫苗免疫效果的评价方法只能在实验室完成，不适合基层检测，需要建立更为灵敏、快捷和简便的可视化的检测方法。

发明内容

有鉴于背景技术中存在的技术问题，本发明的目的在于提供一种A型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用。

本发明提供了一种A型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒，包括包被酶标板、洗涤液、样品稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液，所述包被酶标板以A型口蹄疫病毒作为包被抗原，所述包被抗原的包被浓度为1.5～3μg/mL。

优选的，所述包被酶标板由封闭液封闭包被抗原制得，所述封闭液为包括40～60g/L脱脂奶粉的PBST缓冲液，所述封闭的时间为15～25min；所述包被酶标板置于2～6℃保存。

优选的，所述洗涤液为包括0.04％～0.06％体积浓度的吐温-20的磷酸盐缓冲液，pH值为7～7.4。

优选的，所述样品稀释液为包括40～60g/L脱脂奶粉的磷酸盐缓冲液。

优选的，所述底物显色液为TMB溶液。

优选的，所述酶标二抗的稀释倍数为1：(15000～25000)。

优选的，所述终止液为0.8～1.2％体积浓度的SDS溶液。

本发明提供了上述可视化快速检测试剂盒在对A型口蹄疫病毒抗体进行接种疫苗后的检测中的应用。

优选的，所述应用包括如下步骤：

(1)取待检测的离体样品，用所述样品稀释液对离体样品进行稀释，所述稀释的倍率为1：(30～50)，得到稀释样品；

(2)将所述稀释样品加入到包被酶标板中，20～22℃孵育30～40min，弃反应液，洗涤液洗板，干燥；

(3)将所述酶标二抗加入到步骤(2)所述干燥后的酶标板中，20～22℃孵育30～40min，弃反应液，洗涤液洗板，干燥；

(4)将所述底物显色液加入到步骤(3)所述干燥后的酶标板中，20～22℃显色反应10～20min，判断检测结果。