[发明专利]一种A型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用在审
申请号: | 201910096472.4 | 申请日: | 2019-01-31 |
公开(公告)号: | CN109655623A | 公开(公告)日: | 2019-04-19 |
发明(设计)人: | 陈豪泰;张永光;孙跃峰;祁林林;张杰;潘丽 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 730000 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗体 快速检测试剂盒 包被酶标板 包被抗原 可视化 试剂盒 标准阳性血清 标准阴性血清 生物检测技术 底物显色液 可视化检测 试剂盒操作 样品稀释液 技术手段 快速检测 临床应用 酶标二抗 判定结果 特异性强 颜色变化 灵敏度 洗涤液 终止液 包被 检测 应用 | ||
1.一种A型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒,包括包被酶标板、洗涤液、样品稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液,其特征在于,所述包被酶标板以A型口蹄疫病毒作为包被抗原,所述包被抗原的包被浓度为1.5~3μg/mL。
2.根据权利要求1所述的可视化快速检测试剂盒,其特征在于,所述包被酶标板由封闭液封闭包被抗原制得,所述封闭液为包括40~60g/L脱脂奶粉的PBST缓冲液,所述封闭的时间为15~25min;所述包被酶标板置于2~6℃保存。
3.根据权利要求1所述的可视化快速检测试剂盒,其特征在于,所述洗涤液为包括0.04%~0.06%体积浓度的吐温-20的磷酸盐缓冲液,pH值为7~7.4。
4.根据权利要求1所述的可视化快速检测试剂盒,其特征在于,所述样品稀释液为包括40~60g/L脱脂奶粉的磷酸盐缓冲液。
5.根据权利要求1所述的可视化快速检测试剂盒,其特征在于,所述底物显色液为TMB溶液。
6.根据权利要求1所述的可视化快速检测试剂盒,其特征在于,所述酶标二抗的稀释倍数为1:(15000~25000)。
7.根据权利要求1所述的可视化快速检测试剂盒,其特征在于,所述终止液为0.8~1.2%体积浓度的SDS溶液。
8.权利要求1~7任意一项所述的可视化快速检测试剂盒在对A型口蹄疫病毒抗体进行接种疫苗后的检测中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取待检测的离体样品,用所述样品稀释液对离体样品进行稀释,所述稀释的倍率为1:(30~50),得到稀释样品;
(2)将所述稀释样品加入到包被酶标板中,20~22℃孵育30~40min,弃反应液,洗涤液洗板,干燥;
(3)将所述酶标二抗加入到步骤(2)所述干燥后的酶标板中,20~22℃孵育30~40min,弃反应液,洗涤液洗板,干燥;
(4)将所述底物显色液加入到步骤(3)所述干燥后的酶标板中,20~22℃显色反应10~20min,判断检测结果。
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