[发明专利]一种葫芦的组培快繁方法在审
| 申请号： | 201910095750.4 | 申请日： | 2019-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN109566420A | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 缪倩;程兆榜;任春梅;季英华;杨柳 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 210000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 葫芦 组培快繁 无菌苗 接种 丛生芽 子叶节 丛生芽诱导培养基 植物组织培养技术 固体培养基表面 规模化生产 生根培养基 无菌苗培养 葫芦种子 生根培养 细胞工程 遗传性状 诱导培养 增殖系数 高品质 生根率 砧木苗 转基因 成苗 去壳 剥离 消毒 育种 改良 参考 | ||
1.一种葫芦的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将去壳的葫芦种子消毒，接种到无菌苗固体培养基中进行无菌苗培养，得无菌苗；所述无菌苗固体培养基以MS培养基为基本培养基，还包括以下质量百分比的组分：0.4～0.8％的琼脂和2～4％的蔗糖，pH值为5.8；所述无菌苗培养包括暗培养2～4d后转入光照培养；
2)剥离所述无菌苗的子叶节，将所述子叶节接种于丛生芽诱导培养基中进行诱导培养，得丛生芽；所述丛生芽诱导培养基以MS为基本培养基，还包括：1～4mg/L的6-BA、0.1～0.4mg/L的ZT、分别占所述丛生芽诱导培养基质量0.4～0.8％的琼脂和2～4％的蔗糖，pH值为5.8；
3)分离所述丛生芽后接种于生根培养基中进行生根培养，得葫芦组培快繁苗；所述生根培养基以1/2MS为基本培养基，还包括：0.1～0.3mg/L的IBA、分别占所述生根培养基质量0.4～0.8％的琼脂和2～4％的蔗糖，pH值为5.8。
2.根据权利要求1所述组培快繁方法，其特征在于，步骤1)所述消毒包括依次进行的第一消毒和第二消毒；所述第一消毒为将所述去壳的葫芦种子用体积分数为70～80％的乙醇水溶液浸泡70～90s；所述第二消毒为将第一消毒后的种子用质量分数为8～12％的次氯酸钠水溶液消毒10～15min。
3.根据权利要求1所述组培快繁方法，其特征在于，步骤1)所述光照培养的光照强度为1500～3000lx，所述光照培养的光照时间为14～18h/d，所述光照培养的时间为5～9d。
4.根据权利要求1所述组培快繁方法，其特征在于，步骤2)所述剥离的方法，包括剪取所述无菌苗带下胚轴的子叶，沿轴线纵切所述带下胚轴的子叶，切去子叶上部1/3～3/5的组织，并剔除生长点。
5.根据权利要求1或4所述组培快繁方法，其特征在于，步骤2)所述接种为将所述子叶节近轴面朝上60～85°角斜插接种于所述丛生芽诱导培养基上。
6.根据权利要求1所述组培快繁方法，其特征在于，步骤2)所述诱导培养的温度为22～30℃，所述诱导培养的光照强度为1800～2500lx，所述诱导培养的光照时间为14～18h/d。
7.根据权利要求1所述组培快繁方法，其特征在于，步骤3)所述丛生芽的高度为2～3cm。
8.根据权利要求1所述组培快繁方法，其特征在于，步骤3)所述生根培养的温度为22～30℃，所述生根培养的光照强度为1800～2500lx，所述生根培养的光照时间为14～18h/d。
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