[发明专利]一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱及其构建方法和应用

说明书

本发明涉及中药制剂质量控制技术领域，具体公开了一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱及其构建方法和应用。所述构建方法包括供试品溶液制备、对照品溶液制备、HPLC分析色谱条件的确定、指纹图谱的测定等步骤。本发明还通过对10批次山楂破壁饮片样品HPLC指纹图谱的对比，确定其共有峰，得到标准HPLC指纹图谱。本发明所述构建方法具有操作简便、重现性好、特征峰多、准确可靠的优点。本发明所述HPLC指纹图谱可以更全面的反映样品的特征峰信息，利用该HPLC指纹图谱可以对山楂破壁饮片进行质量控制。

技术领域

本发明涉及中药制剂质量控制技术领域，具体地，涉及一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱及其构建方法和应用。

背景技术

山楂为蔷薇科植物山里红Crataegus pimiatificia Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实，具有消食健胃，行气散瘀，化浊降脂的功效，用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，胸痹心痛，疝气疼痛，髙脂血症，焦山楂可增强消食导滞作用。

中药破壁饮片是利用现代超微粉碎技术将传统饮片进行破细胞壁粉碎成粒度分布D90小于45μm的微细颗粒，再制成30～100目的颗粒。相对于传统饮片具有色泽一致，质量均一，稳定性好的特点为创新型中药饮片。由于中药破壁饮片不具传统中药饮片的形态特征，破壁后会带来有效成分或指标成分等化学成分的溶出度变化，使传统饮片的鉴别、质量检测方法不能完全适用。且根据文献调研，目前对于山楂的指纹图谱研究多达20篇。如汤树良等以金丝桃苷作为参照峰，建立了以18个峰为共有峰来鉴别不同种源山楂药材的HPLC指纹图谱方法；又如张俐伟等以金丝桃苷作为参照峰，建立了以12个峰为共有峰来鉴别不同产地山楂药材的HPLC指纹图谱方法，之后将方法优化后，以14个峰作为共有峰，用于鉴别不同炮制方法的山楂药材；又如陈宝龙等以芦丁、金丝桃苷为参照峰，建立了以27个峰为共有峰的山楂黄酮类成分的HPLC指纹图谱方法，等等。但现有的指纹图谱构建方法供试品制备操作耗时长，且专属性、稳定性、重现性和精密度差等缺陷，不能全面反映饮片质量的缺陷，同时尚无针对形态特殊的山楂破壁饮片的质量检测方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有山楂破壁饮片质量检测方法的缺陷和不足，提供一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱及其构建方法和应用。

本发明的目的是提供一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱的构建方法，该构建方法具有操作简便、重现性好、特征峰多、准确可靠的优点。

本发明的另一目的在于提供一种山楂破壁饮片HPLC指纹图谱。

本发明的另一目的在于提供一种山楂破壁饮片标准HPLC指纹图谱。

本发明的另一目的在于提供上述山楂破壁饮片HPLC指纹图谱和/或标准HPLC指纹图谱在检测山楂破壁饮片质量中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种山楂破壁饮片的质量控制方法。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

S1.供试品溶液制备：精密称取山楂破壁饮片，按质量体积比为1:(25～100)加入50～100％甲醇，浸润后于1.2万～1.7万转匀浆处理1～5min，取出冷却至室温，用50～100％甲醇补足失重，摇匀，粗滤后再经0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液即得供试品溶液；

S2.对照品溶液制备：以绿原酸为对照品，加甲醇配制成对照品溶液；

S3.HPLC分析的色谱条件：将S1所得供试品溶液过十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温20～40℃；以乙腈-甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱；流速为0.6～1.2mL/min；检测波长为280nm；