[发明专利]一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.供试品溶液制备：精密称取山楂破壁饮片，按质量体积比为1g：25mL～1g：100mL加入50～70%甲醇，浸润后于1.2万～1.7万转匀浆处理1～5 min，取出冷却至室温，用50～70%甲醇补足失重，摇匀，粗滤后再经0.22 μm微孔滤膜过滤，取滤液即得供试品溶液；

S2.对照品溶液制备：以绿原酸为对照品，加甲醇配制成对照品溶液；

S3.HPLC分析的色谱条件：将S1所得供试品溶液过十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温20～30℃；以乙腈-甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱；流速为0.6～0.7 mL/min；检测波长为280 nm；

所述流动相乙腈在梯度洗脱过程中体积分数变化为：0～10 min，5%～8%；10 min～20min，8%～8%；20 min～30 min，8%～11%；30 min～45 min，11%～14%；45 min～70 min，14%～28%；70 min～75 min，28%～5%；75 min～85 min，5%～5%；

所述流动相0.1%甲酸溶液在梯度洗脱过程中体积分数变化为：0～10 min，95%～90%；10 min～20 min，90%～90%；20 min～30 min，90%～87%；30 min～45 min，87%～84%；45min～70 min，84%～70%；70 min～75 min，70%～95%；75 min～85 min，95%～95%；

S4.在步骤S3的色谱条件下分析供试品溶液，即得山楂破壁饮片的HPLC指纹图谱。

2.根据权利要求1所述构建方法，其特征在于，步骤S1中所述山楂破壁饮片与甲醇的质量体积比为1：25。

3.根据权利要求1所述构建方法，其特征在于，步骤S1中所述匀浆处理的条件为1.2万转，处理的时间为2 min。

4.根据权利要求1所述构建方法，其特征在于，步骤S2中所述的对照品溶液通过以下步骤制备得到：精密称取绿原酸对照品，加甲醇配制成浓度为0.5 mg/mL对照品溶液。

5.一种山楂破壁饮片标准HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，是通过权利要求1至4任一项所述构建方法，构建得到10批次山楂破壁饮片样品的HPLC指纹图谱，将得到的HPLC指纹图谱导入指纹图谱分析软件，生成指纹图谱共有模式即得；所述标准HPLC指纹图谱有11个共有峰。

6.根据权利要求5所述山楂破壁饮片标准HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述标准HPLC指纹图谱有11个共有峰，以6号峰的保留时间为参照，其余10个共有峰的相对保留时间分别为0.278、0.295、0.393、0.746、0.888、1.130、1.180、1.423、1.438、1.456。

7.权利要求1至4任一项所述方法构建得到的山楂破壁饮片HPLC指纹图谱、权利要求5所述方法构建得到的山楂破壁饮片标准HPLC指纹图谱和/或权利要求6所述方法构建得到的山楂破壁饮片标准HPLC指纹图谱在检测山楂破壁饮片质量中的应用。