[发明专利]一种水产品中己烯雌酚残留量的检测方法

权利要求书

1.一种水产品中己烯雌酚残留量的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)制备标准试剂

称取10mg己烯雌酚，用甲醇定容与10mL容量瓶中，得到浓度为100mg/L的标准试剂，置于18℃恒温环境中保存；

(2)提取待衍生样液

将5.00g匀浆样品置于50mL离心管，加入0.5g无水硫酸镁、8mL乙酸乙酯涡旋混合2min后，于5000r/min离心5min，得到第一待衍生样液；取2mL脱水后的第一待衍生样液于2mL离心管，加入0.2g中性氧化铝，离心后准确移取1mL上清液待衍生，得到第二待衍生样液；

(3)试样的衍生化

取1mL第二待衍生样液，氮吹至近干，加入100μL衍生化试剂，密封；于100℃反应0.5h，取出冷却至室温，氮吹至近干，准确加入1mL正己烷，涡旋混合30s，供GC-MS检测分析；

(4)标准工作溶液的衍生化

以甲醇作溶剂将标准试剂配置成0μg/L、5μg/L、10μg/L、20μg/L、500μg/L、100μg/L的标准工作溶液，各取1mL标准工作溶液于2mL样品瓶，氮吹至近干，分别加入衍生化试剂，于100℃反应0.5h，冷却至室温，氮吹至近干，准确加入1mL正己烷，涡旋混合30s，供GC-MS检测分析；

(5)计算浓度

根据标准工作溶液的分析结果建立标准曲线，所述标准曲线为在以峰面积纵坐标、以对应的己烯雌酚的浓度为横坐标建立的标准坐标系中绘制形成的一元线性回归峰面积与浓度的关系曲线；

根据第二待衍生样液的分析结果依据标准曲线得到第二待衍生样液中的己烯雌酚浓度，并根据标准曲线方程计算得到己烯雌酚的含量。

2.根据权利要求1所述的水产品中己烯雌酚残留量的检测方法，其特征在于，所述衍生化试剂为体积比为BSTFA：TMCS＝99:1的试剂。

3.根据权利要求1所述的水产品中己烯雌酚残留量的检测方法，其特征在于，GC-MS进行检测分析时，色谱柱的柱温按照以下过程变化：初始温度40℃保持2min，再以10℃/min升至120℃后保持1min，再以25℃/min升至250℃后保持2min，再以10℃/min升至290℃。

4.根据权利要求1所述的水产品中己烯雌酚残留量的检测方法，其特征在于，所述标准曲线方程为：R＝C*V/M；其中，

R为第二待衍生样液中己烯雌酚含量；

C为由标准曲线得出的第二待衍生样液中己烯雌酚的浓度；

V为第二待衍生样液的体积；

M为第二待衍生样液的质量。