[发明专利]臭七次生代谢物及其制备方法与其在制药中的应用

权利要求书

1.如下结构式所示的臭七次生代谢物2，4-7，

2.如权利要求1所述的臭七次生代谢物2，4-7，其特征在于该5个化合物来源于臭七的次生代谢物。

3.抗炎药物组合物，其含有权利要求1所述的臭七次生代谢物2，4-7单体或混合物作为有效成分，并至少包含一种药学上可接受的载体。

4.权利要求1所述的臭七次生代谢物2，4-7的制备方法，其特征在于该方法是将风干的臭七粉碎，60℃条件下甲醇回流提取3次，过滤，滤液经真空浓缩去除有机溶剂，上大孔树脂层析柱，以纯水洗脱去除多糖，再用甲醇洗脱得皂苷粗品，皂苷粗品上硅胶层析柱，用氯仿︰甲醇体积比为7︰3的溶剂洗脱，得三个部分A，B和C；B部分继续上RP-18，用甲醇︰水体积比从1︰9到9︰1的溶剂进行梯度洗脱，得到8个部分B1-B8，将B1继续上硅胶层析柱，用氯仿︰甲醇体积比10︰1的溶剂洗脱得4个部分B1.1-B1.4，将B1.2上RP-18半制备柱层析，用甲醇︰水体积比从1︰1到9︰1的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物2；B4部分上硅胶层析柱，用氯仿︰甲醇体积比200︰1的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物7；B5部分上硅胶层析柱，氯仿︰甲醇体积比200︰1到50︰1的溶剂洗脱得5个部分B5.1-B5.5，B5.5部分经半制备高效液相色谱仪纯化，经乙腈︰水体积比43:57的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物4；B7部分上硅胶柱层析，氯仿︰甲醇体积比200︰1到50︰1的溶剂洗脱得5个部分B7.1-B7.5，B7.3部分上RP-18层析柱，甲醇︰水体积比为50:50的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物6；并经半制备高效液相色谱仪纯化，用乙腈︰水体积比43:57的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物5。

5.权利要求1所述的臭七次生代谢物2，4-7在制备预防炎症性病变的药物中的应用。

6.权利要求1所述的臭七次生代谢物2，4-7在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。

7.权利要求3所述的药物组合物在制备预防炎症性病变的药物中的应用。

8.权利要求3所述的药物组合物在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。

9.权利要求1所述的臭七次生代谢物2，4-7对抑制小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7一氧化氮产生的影响评价方法，其特征在于该方法是将小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7接种于96空板中，接种密度为1.5×10⁵个细胞/孔，化合物2，4-7分别溶解于DMSO溶剂中，制备出浓度为50μM的溶液及其连续梯度稀释溶液，之后进行细胞处理，每个处理设3个重复，用浓度为1μg/mL的肉毒素LPS进行刺激，18小时后采用Griess试剂对上清液中的一氧化氮生成进行评价，于570nm处检测吸收值，采用Reed-Muench法计算各化合物的半抑制浓度IC₅₀值；同时，采用一氧化氮合成酶抑制剂NG-Methyl-l-arginine醋酸盐，半抑制浓度IC₅₀＝39.26±0.91μM作为阳性对照。