[发明专利]银离子检测方法、银离子检测试剂盒及用于检测银离子的核酸适配体有效
| 申请号： | 201910084331.0 | 申请日： | 2019-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN109810979B | 公开（公告）日： | 2020-10-23 |
| 发明（设计）人： | 刘巍;杨丽娟;于凯利 | 申请（专利权）人： | 新乡医学院 |
| 主分类号： | C12N15/115 | 分类号： | C12N15/115;G01N33/53 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 林青中 |
| 地址： | 453099 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 银离子 检测 方法 试剂盒 用于 核酸 适配体 | ||
1.一种银离子检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
提供待测样品；
将所述待测样品与氧化石墨烯、双链特异性核酸外切酶和带有荧光标记的核酸适配体混合得到混合物，所述核酸适配体为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；
将所述混合物在35～40℃条件下孵育5～40min，然后进行失活处理以使所述双链特异性核酸外切酶失活；
检测所述失活处理后的混合物的荧光强度，并根据所述荧光强度确定所述待测样品中银离子的浓度。
2.根据权利要求1所述的银离子检测方法，其特征在于，所述混合物中所述氧化石墨烯的浓度为5～15μg/mL。
3.根据权利要求1所述的银离子检测方法，其特征在于，所述混合物中所述双链特异性核酸外切酶的浓度为30～50U。
4.根据权利要求1所述的银离子检测方法，其特征在于，所述混合物在35～40℃条件下的孵育时间为15～25min。
5.根据权利要求1所述的银离子检测方法，其特征在于，所述混合物中所述带有荧光标记的核酸适配体的浓度为40～60nmol/L。
6.根据权利要求1～5任一项所述的银离子检测方法，其特征在于，所述荧光标记为羧基荧光素。
7.根据权利要求6所述的银离子检测方法，其特征在于，检测所述失活处理后的混合物的荧光强度的条件为：激发波长为490～498nm，发射波长为510nm～650nm，入射狭缝的宽度为1～10nm，出射狭缝的宽度为1～10nm。
8.根据权利要求1～5任一项所述的银离子检测方法，其特征在于，所述双链特异性核酸外切酶为核酸外切酶III。
9.一种银离子检测试剂盒，其特征在于，包括氧化石墨烯、双链特异性核酸外切酶和带有荧光标记的核酸适配体，所述核酸适配体为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
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