[发明专利]一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒在审
| 申请号： | 201910074363.2 | 申请日： | 2019-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN109666765A | 公开（公告）日： | 2019-04-23 |
| 发明（设计）人： | 李招发;汪赛;熊莹喆;杨会勇;林俊生 | 申请（专利权）人： | 华侨大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;陈丹艳 |
| 地址： | 362000 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 快速诊断 现场快速检测 核苷酸序列 羟基萘酚 可视化 双引物 成环 富集 扩增 配体 适体 显色 | ||
1.一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于：包括如SEQ ID No.1至SEQ IDNo.7所示的序列，其中SEQ ID No.1为H1N1流感病毒的核酸适体序列，SEQ ID No.2至SEQID No.5为成环反应序列，SEQ ID No.6至SEQ ID No.7为RCA反应体系引物。
2.根据权利要求1所述的一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于，所述RCA反应体系每50μL中包括：
3.根据权利要求1所述的一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于，所述RCA反应体系每50μL中包括：
4.根据权利要求1所述的一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于：所述H1N1流感病毒的核酸适体序列SEQ ID No.1分别采用H1N1完整病毒颗粒和B型流感病毒颗粒进行点杂交实验进行验证。
5.根据权利要求1所述的一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于：所述H1N1流感病毒的核酸适体采用磁珠-多价适体。
6.根据权利要求5所述的一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于：所述磁珠-多价适体捕获H1N1流感病毒的缓冲液组分为0.5M NaCl、20mM Tris-HCL和1mM EDTA，缓冲液pH＝7.5。
7.根据权利要求1所述的一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于：所述成环反应步骤为在H1N1病毒颗粒的裂解液中加入SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示的序列，及15μL ddH2O于PCR管中，95℃反应4～6min,37℃放置12～18min,加入3μL 10×T4 DNA ligasebuffer、1μL 400U/μL T4 DNA连接酶,置25℃反应1h，反应结束后加入0.5μL 5U/μL核糖核酸酶A，37℃反应8～12mim。
8.根据权利要求7所述的一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，其特征在于：所述裂解液包括磁分离的H1N1病毒样品和10mM Tris-HCl、2.5mg/mL蛋白酶K，裂解液pH＝7.5。
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