[发明专利]一种去除重组人白介素-2原液中残留乙腈的方法

说明书

本发明公开了一种去除重组人白介素‑2原液中残留乙腈的方法，包括如下步骤：(a)取适量重组人白介素‑2原液测量其活性，根据其活性总量按总活性：水：甘露醇为150×10⁶IU：40ml：15ml的配比加入水进行稀释，再加入甘露醇作为骨架剂得到第一混合物；(b)将所述第一混合物以液面不超过2cm的高度倒入不锈钢盘中，送入冻干机冻干得到重组人白介素‑2冻干粉。本发明通过增加原液冻干工艺，将液体状态原液制备成冻干粉末储存；通过冻干过程，可将乙腈残留去除，且以冻干粉形式储存，不改变产品的生物学活性成分，因含水量极少，能有效的提高产品储存期间的稳定性。

技术领域

本发明涉及制备重组人白介素-2过程中去除乙腈的方法，特别涉及一种去除重组人白介素-2原液中残留乙腈的方法。

背景技术

生物制品重组人白介素-2原液生产的最后一步通常采用反相色谱法进行纯化，纯化的流动相中的有机溶剂乙腈，通常采用离心浓缩方式除去原液中的乙腈，再经稀释，除菌过滤，加保护剂，得成品原液，封口保存。采用此方法除乙腈，可能导致原液中仍有乙腈残留，影响原液的质量。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种去除重组人白介素-2原液中残留乙腈的方法。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：

一种去除重组人白介素-2原液中残留乙腈的方法，包括如下步骤：

(a)取适量重组人白介素-2原液测量其活性，根据其活性总量按总活性：水：甘露醇为150×10⁶IU：40ml：15ml的配比加入水进行稀释，再加入甘露醇作为骨架剂得到第一混合物；

(b)将所述第一混合物以液面不超过2cm的高度倒入不锈钢盘中，送入冻干机冻干得到重组人白介素-2冻干粉。

优选的，所述甘露醇为20％甘露醇。

优选的，所述步骤(b)中送入冻干机后的参数设定为：设定预冻温度-40℃，待进油温度达-40℃，保温1～3小时；预抽真空20Pa，以1℃/3min速率升温至-0℃，继续保温12～16小时，真空控制2～30Pa；以1℃/3min速率升温至40℃，继续保温4小时以上。

采用上述技术方案，本发明通过增加原液冻干工艺，将液体状态原液制备成冻干粉末储存；通过冻干过程，可将乙腈残留去除，且以冻干粉形式储存，不改变产品的生物学活性成分，因含水量极少，能有效的提高产品储存期间的稳定性。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

实施例1

取适量重组人白介素-2原液，测试其活性得到总活性量为：150×10⁸IU，加4000mL水进行稀释，再加入1500mL的20％甘露醇作为骨架剂，将溶液以液面不超过2cm的高度倒入不锈钢盘中，送入冻干机；

冻干工艺设计：设定预冻温度-40℃，待进油温度达-40℃，保温1～3小时；预抽真空20Pa，以1℃/3min速率升温至-0℃，继续保温12～16小时，真空控制2～30Pa；以1℃/3min速率升温至40℃，继续保温4小时以上。

实施例2

取适量重组人白介素-2原液，测试其活性得到总活性量为：30×10⁸IU，加800mL水进行稀释，再加入300mL的20％甘露醇作为骨架剂，将溶液以液面不超过2cm的高度倒入不锈钢盘中，送入冻干机；