[发明专利]一种催化性能提高的角蛋白酶突变体及应用在审
申请号: | 201910068548.2 | 申请日: | 2019-01-24 |
公开(公告)号: | CN109593746A | 公开(公告)日: | 2019-04-09 |
发明(设计)人: | 史劲松;龚劲松;苏畅;许正宏;李恒;孙雨欣 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/52 | 分类号: | C12N9/52;C12N15/55;C12N15/75;C12N15/70;C12N1/21 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 杨慧林 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 角蛋白酶 前导肽 蛋白酶 催化性能 工程改造 突变体 酶活 基因工程技术 催化潜力 剪切特性 热稳定性 通用途径 重组菌株 反应pH 工业酶 多位 高角 构建 水浴 修饰 突变 应用 饱和 保留 表现 | ||
1.一种角蛋白酶突变体,其特征在于,以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的角蛋白酶为亲本,将亲本角蛋白酶前导肽切割位点P1的酪氨酸、前导肽区域第42位点的丝氨酸、54位点的天冬酰胺、62位点的异亮氨酸、91位点的谷氨酸、95位点的丝氨酸中至少一处突变为其他的氨基酸。
2.根据权利要求1所述的角蛋白酶突变体,其特征在于,将亲本角蛋白酶前导肽切割位点P1的酪氨酸突变为苯丙氨酸。
3.根据权利要求1所述的角蛋白酶突变体,其特征在于,将亲本角蛋白酶前导肽切割位点P1的酪氨酸突变为苯丙氨酸,以及将前导肽区域第42位点的丝氨酸突变为天冬氨酸、54位点的天冬酰胺突变为苯丙氨酸、62位点的异亮氨酸突变为谷氨酸、91位点的谷氨酸突变为天冬酰胺、95位点的丝氨酸突变为谷氨酸。
4.根据权利要求1所述的角蛋白酶突变体,其特征在于,将亲本角蛋白酶前导肽切割位点P1的酪氨酸突变为苯丙氨酸,以及将前导肽区域第42位点的丝氨酸突变为天冬氨酸、54位点的天冬酰胺突变为丙氨酸、62位点的异亮氨酸突变为赖氨酸、95位点的丝氨酸突变为天冬氨酸。
5.一种编码权利要求1~4任一项所述的角蛋白酶突变体的基因。
6.一种携带权利要求5所述的基因的重组质粒。
7.一种表达权利要求1~4任一项所述的角蛋白酶突变体的重组菌。
8.根据权利要求7所述的重组菌,其特征在于,所述的重组菌是以芽孢杆菌、大肠杆菌、酵母或丝状真菌为宿主菌。
9.权利要求1~4任一项所述的角蛋白酶突变体在医药、化工、饲料、纺织或制革行业中的应用。
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