[发明专利]一种从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法

权利要求书

1.一种从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法，其特征在于，包括：将粒径为9.1～128.6nm的磁性氧化铁纳米颗粒直接加入枸杞发酵液中，并控制摇床转速为80～250rpm，吸附时间为2～12h，使磁性氧化铁纳米颗粒充分吸附抗肿瘤因子枸杞多糖；在完成吸附后，以电磁铁将磁性氧化铁纳米颗粒从枸杞发酵液中分离出，并分散于水-乙醇混合溶剂中，超声10～30min，之后将磁性氧化铁纳米颗粒分离回收，所得清液包含富集的抗肿瘤因子枸杞多糖。

2.根据权利要求1所述的从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法，其特征在于，所述磁性氧化铁纳米颗粒于枸杞发酵液中的添加量为4～9g/L。

3.根据权利要求1所述的从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法，其特征在于，还包括：将回收的磁性氧化铁纳米颗粒以去离子水和浓度为0.05～0.1mol/L的乙酸缓冲液交替清洗，实现对所述磁性氧化铁纳米颗粒的再生处理。

4.根据权利要求1所述的从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法，其特征在于，包括：将三价铁盐溶液与碱溶液于35～70℃搅拌0.2～1小时，之后转移至高压釜内反应，反应温度为120～200℃，时间为2～4h，制得磁性氧化铁纳米颗粒；其中，三价铁盐溶液的浓度为0.1～1M，碱溶液浓度为0.2～1.5M，三价铁盐溶液和碱溶液的体积比为1:1～1:5。

5.根据权利要求4所述的从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法，其特征在于，所述三价铁盐包括氯化铁、硫酸铁和硝酸铁中的任意一种或两种以上的组合。

6.根据权利要求1所述的从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法，其特征在于，所述碱溶液包括氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液和硼氢化钠溶液中的任意一种或两种以上的组合。

7.根据权利要求1所述的从枸杞发酵物中分离抗肿瘤活性成分的方法，其特征在于，所述枸杞发酵液的制备方法包括：

1)将枸杞粉碎后加入8～15倍量水，浸泡2～4小时后煎煮1～3小时，药液滤过，滤液备用，在相同条件下将药渣重复提取1～3次，过滤，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.06～1.55，得到浓缩滤液；

2)将上述浓缩滤液与药渣混合，搅拌均匀后按照0.5％～5％质量比接入甜酒曲或黄酒曲，调节pH至7～9，温度为16～35℃，厌氧发酵处理7～14天，得到混合发酵物；

3)将上述混合发酵物在100℃条件下灭菌1～3小时，冷却至室温后过滤，滤液经纯化后对其进行低温减压浓缩，直至相对密度为1.15～1.55，得到浓缩发酵液。