[发明专利]一种纯化卡里奇霉素的制备方法

权利要求书

1.一种纯化卡里奇霉素γ₁^I的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)将卡里奇霉素γ₁^I粗品进行正相制备柱层析，用有机溶剂进行洗脱，收集并合并含有卡里奇霉素γ₁^I的洗脱液；

(2)从步骤(1)所得洗脱液中分离得到卡里奇霉素γ₁^I精制品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述卡里奇霉素γ₁^I粗品是由以下方法制备得到的：

(a)将含有卡里奇霉素γ₁^I的发酵液进行预处理，得到含有卡里奇霉素γ₁^I的溶液；

(b)将步骤(a)所得卡里奇霉素γ₁^I的溶液进行浓缩，得到含有卡里奇霉素γ₁^I的浓缩液1；

(c)步骤(b)所得浓缩液1经过洗涤液洗涤后得到含有卡里奇霉素γ₁^I的有机相，将该有机相继续浓缩得到浓缩液2；

(d)步骤(c)所得到的浓缩液2经过沉淀溶剂沉淀，过滤得到卡里奇霉素γ₁^I粗品。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(a)所述的预处理包括以下步骤：将含有卡里奇霉素γ₁^I的发酵液用0.5-2倍发酵液体积的有机溶剂进行混合，所述有机溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯或醋酸异丙酯，优选乙酸乙酯；然后将所得的混合物进行离心或过滤后分层，得到含有卡里奇霉素γ₁^I的有机溶液。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，步骤(b)所述的浓缩使用的方法是单罐浓缩或者刮板浓缩，浓缩至原体积的三分之一到四分之一。

5.根据权利要求2-4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(c)中，所述的洗涤液为0.5％kg/L氢氧化钠溶液或者2-5％kg/L碳酸钠溶液，优选2-5％kg/L碳酸钠溶液；所述的洗涤液的体积与浓缩液1的体积比为0.5-2:1；所述的浓缩液1与浓缩液2的体积比为10-20:1。

6.根据权利要求2-5任一项所述的方法，其特征在于，步骤(d)中，所述的沉淀溶剂为正庚烷或正己烷，优选正己烷；所述的沉淀溶剂的体积为浓缩液2体积的3-5倍。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的正相制备柱层析的制备柱填料为华谱X5正相填料。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的有机溶剂为乙酸乙酯-甲醇溶剂系统或二氯甲烷-甲醇溶剂系统。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的有机溶剂为乙酸乙酯-甲醇＝100:1-10(V:V)，或二氯甲烷-甲醇＝100:1-10(V:V)的溶液，优选二氯甲烷-甲醇＝100:3-6(V:V)的溶液。

10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，收集并合并卡里奇霉素γ₁^IHPLC纯度≥99％的洗脱液。