[发明专利]一种脂肪酸诱导型启动子及其应用

权利要求书

1.一种脂肪酸诱导型启动子质粒载体的基因工程菌的应用，其特征在于：作为诱导荧光蛋白表达，检测脂肪酸在酿酒酵母中代谢含量变化的应用，步骤为：将脂肪酸分别加入到已接种工程菌的液体培养基中培养，诱导荧光蛋白表达，然后使用荧光分光光度计检测其中红色荧光与绿色荧光的值，并计算两者的比值；

所述基因工程菌的构建方法为：首先将外源基因eGFP克隆到载体PRS316，制备绿色荧光重组载体，然后将启动子质粒载体和绿色荧光重组载体同时转入酿酒酵母中，通过营养缺陷筛选基因工程菌；

所述启动子质粒载体为将启动子克隆并连接到载体PmCherry-leu2中，替换PmCherry-leu2中的GPD1启动子获得，其中启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；

所述酿酒酵母为酿酒酵母BY4741或BY4742；

所述营养缺陷是指在SC-Ura-Leu营养缺陷型培养基上培养并筛选。

2.根据权利要求1所述的构建的基因工程菌的应用，其特征在于：所述脂肪酸的含量为0.5-1mM。

3.根据权利要求1所述的构建的基因工程菌的应用，其特征在于，所述培养条件为：将工程菌的种子液按照OD₆₀₀为0.02-0.05的接种量接种到营养缺陷液体培养基中，28-30℃，180r/min培养14-16h。