[发明专利]一种靶向纳米给药系统及制备方法

权利要求书

1.一种靶向纳米给药系统，其特征在于：所述给药系统是由靶向环肽Cylic-L-Arg-L-Gly-L-Asp-D-Phe-L-Cys、聚乙二醇修饰的聚己内酯、阿霉素和二氢卟吩制备而成，所述方法包括以下步骤：

1）合成环肽Cylic-L-Arg-L-Gly-L-Asp-D-Phe-L-Cys；

2）通过迈克尔加成反应将环肽Cylic-L-Arg-L-Gly-L-Asp-D-Phe-L-Cys连接到载体聚乙二醇修饰的聚己内酯上，制备成纳米载体，所述纳米载体结构式为：

3）将所述的纳米载体、阿霉素和二氢卟吩的混合物溶于N，N-二甲基甲酰胺中、搅拌，将磷酸盐缓冲盐水倒入并搅拌得到混合物；将混合物装入透析袋中并用磷酸盐缓冲盐水透析过夜。

2.根据权利要求1所述的靶向纳米给药系统的制备方法，其特征在于：所述环肽Cylic-L-Arg-L-Gly-L-Asp-D-Phe-L-Cys的合成步骤如下：

4-1）首先将Fmoc- Arg（pbf）-OH引入2-氯三苯甲基氯树脂，固相合成直链五肽COOH-Arg(pbf)-Gly-Asp(otbu)-D-Phe- Cys (Trt)-NH₂；

4-2）利用(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯烷基六氟磷酸盐/1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑/ N,N-二异丙基乙胺体系对所述的直链五肽COOH-Arg(pbf)-Gly-Asp(otbu)-D-Phe- Cys (Trt)-NH₂进行液相环合，再脱去二氢苯并呋喃、氧叔丁基和三苯甲基保护，得到所述环肽Cylic-L-Arg-L-Gly-L-Asp-D-Phe-L-Cys。

3.根据权利要求2所述的靶向纳米给药系统的制备方法，其特征在于：所述环肽Cylic-L-Arg-L-Gly-L-Asp-D-Phe-L-Cys合成具体包括以下步骤：

（a）首先将2-氯三苯甲基氯树脂在二氯甲烷中浸泡，然后加入N-芴甲氧羰基-精氨酸（二氢苯并呋喃）、N，N-二异丙基乙胺，室温搅拌反应，生成的N-芴甲氧羰基-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂，经过脱保护试剂进行脱保护，得到精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂；

（b）将N-芴甲氧羰基甘氨酸加入到精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂溶液中，室温搅拌，再加N，N-二异丙基乙胺、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，反应，得到N-芴甲氧羰基甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂，该产物再经过脱保护试剂进行脱保护，得到甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂；

（c）将N-芴甲氧羰基天冬氨酸加入到甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂溶液中，室温搅拌，再加N，N-二异丙基乙胺，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，反应，得到N-芴甲氧羰基天冬氨酸-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂，该产物再脱保护试剂进行脱保护，得到天冬氨酸-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂；

（d）将N-芴甲氧羰基D-苯丙氨酸（氧叔丁基）加入到天冬氨酸-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂溶液中，室温搅拌，再加N，N-二异丙基乙胺，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，反应，得到N-芴甲氧羰基D-苯丙氨酸（氧叔丁基）-天冬氨酸-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂，该产物再脱保护试剂进行脱保护，得到D-苯丙氨酸（氧叔丁基）-天冬氨酸（氧叔丁基）-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂；

（e）将N-芴甲氧羰基半胱氨酸（三苯甲基）加入到D-苯丙氨酸（氧叔丁基）-天冬氨酸（氧叔丁基）-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂溶液中，室温搅拌，再加N，N-二异丙基乙胺、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，反应，得到N-芴甲氧羰基-半胱氨酸（三苯甲基）-D-苯丙氨酸（氧叔丁基）-天冬氨酸（氧叔丁基）-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂，该产物再脱保护试剂进行脱保护，得到半胱氨酸（三苯甲基）-D-苯丙氨酸（氧叔丁基）-天冬氨酸（氧叔丁基）-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂；

（f）将半胱氨酸（三苯甲基）-D-苯丙氨酸（氧叔丁基）-天冬氨酸（氧叔丁基）-甘氨酸-精氨酸（二氢苯并呋喃）-2-氯三苯甲基氯树脂采用三氟乙醇、乙酸、二氯甲烷的混合溶液脱去2-氯三苯甲基氯树脂，得到直链五肽精氨酸（二氢苯并呋喃）-甘氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸（氧叔丁基）-半胱氨酸（三苯甲基）、减压蒸发，用高效液相色谱分离；

（g）将直链精氨酸（二氢苯并呋喃）-甘氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸（氧叔丁基）-半胱氨酸（三苯甲基）溶于二氯甲烷，加入(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯烷基六氟磷酸盐、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、N，N-二异丙基乙胺，冰浴下搅拌反应，生成环（精氨酸（二氢苯并呋喃）-甘氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸（氧叔丁基）-半胱氨酸（三苯甲基））肽，过凝胶柱，用高效液相色谱分离；

（h）将环（精氨酸（二氢苯并呋喃）-甘氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸（氧叔丁基）-半胱氨酸（三苯甲基））肽，在三氟乙酸和水的混合溶液作用下脱去保护基得到所述环肽Cylic-L-Arg-L-Gly-L-Asp-D-Phe-L-Cys。