[发明专利]一条特异性检测乳酸乳球菌株IMAU11823的基因及其扩增用引物对、试剂盒和方法有效
申请号: | 201910044217.5 | 申请日: | 2019-01-17 |
公开(公告)号: | CN109468397B | 公开(公告)日: | 2021-08-13 |
发明(设计)人: | 于洁;孙志宏;张和平;李伟程;任敏 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 代芳 |
地址: | 010000 内蒙古*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一条 特异性 检测 乳酸 球菌 imau11823 基因 及其 扩增 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种检测乳酸乳球菌株IMAU11823的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)从待测样品中提取基因组DNA,得到PCR用模板DNA;
(2)利用引物对对步骤(1)所述模板DNA进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;
(3)利用琼脂凝胶电泳对PCR扩增产物进行判断;所述引物对包括上游引物和下游引物;上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述待测样品包括发酵乳制品。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述PCR扩增为50μL反应体系:10×PCRmix10μL,10mol/L上游引物0.4μL,10mol/L下游引物0.4μL,DNA模板100ng,双蒸水补充至50μL。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述PCR扩增的反应程序为:95℃变性3min;95℃变性1min,58℃退火45s,72℃延伸90S,循环30次;最后72℃延伸7min,4℃保存。
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