[发明专利]沙漠自源固化菌株的分离方法及其固化砂土能力验证方法

说明书

本发明公开了沙漠自源固化菌株的分离方法及其固化砂土能力验证方法。菌株的分离方法如下：从内蒙古沙漠中取深度120～150cm处的沙漠土壤，放入液体培养基中振荡并制备成不同浓度的稀释溶液，然后不同浓度的稀释溶液将分别涂布于固体培养基上，进行恒温培养。再挑取固体培养基上的单菌落进行试培养并选取有固化效果的菌落，反复划线5‑6次进行纯化，直至出现单菌落并选为所述沙漠自源固化菌株。本发明通过分离纯化技术从混杂的天然微生物中分离出芽孢杆菌，其具有很好的研究和应用价值，并适合在砂类土壤的结皮与改良中大规模推广。芽孢杆菌作为一种新型固化土壤的微生物菌种，其具有很好的固化能力。

技术领域

本发明涉及沙漠自源固化菌株制备技术领域，尤其涉及沙漠自源固化菌株的分离方法及其固化砂土能力验证方法。

背景技术

沙漠化是当前社会每个国家都面临的问题。对沙漠治理，首先需对沙漠中的砂土进行固结。避免采用化学固剂进行固结而带来的环境污染，目前大多利用绿色环保的微生物对砂土进行固结。这其中，因胶结芽孢杆菌(芽孢杆菌的一种)能分解硅酸盐和铝硅酸盐及其他矿石中的含钾矿物，并且具有溶磷、释钾和固氮功能，其能明显的改良土壤性质并提高土壤保水保肥。因此，如何从沙漠土壤中分离出胶结芽孢杆菌，达到以沙制沙的目的，是一个重要的研究方向。

发明内容

本发明的目的在于提供沙漠自源固化菌株的分离方法及其固化砂土能力验证方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：沙漠自源固化菌株的分离方法，其分离得到的沙漠自源固化菌株用于改良和固化易风化砂土，其特征在于，包括以下步骤：

S1、从内蒙古沙漠土中取地表120～150cm处的沙漠土n克，放入10n克的无菌蒸馏水中振摇15～20min后静置12h，取上清液备用；

S2、将上清液接种至一号液体培养基中，进行恒温振荡培养；

S3、按稀释的浓度梯度，将步骤S2中恒温震荡培养后的液体制备成不同浓度的稀释溶液，并将所述不同浓度的稀释溶液分别涂布于上表面具有一号固体培养基的平板上，然后进行恒温培养，培养时间1～2d，培养温度30～ 37℃；

S4、选取步骤S3中固体培养基上的单菌落，接种至二号液体培养基中培养，然后选取在二号液体培养基中培养1～2d的菌液进行固化实验验证；

S5、选取步骤S4中固化效果最好的单菌落继续接种至二号固体培养基中，反复划线，进行5～6次纯化培养，得到所述沙漠自源固化菌株。

优选的，所述步骤S2中一号液体培养基进行恒温振荡培养的条件如下：

振荡温度30～37℃，振荡频率140～180r/min，pH为培养基自然pH，培养时长1～2d。

优选的，所述一号液体培养基和二号液体培养基均包括酵母粉、蔗糖和蒸馏水，在每升蒸馏水中，酵母粉占16～21g、蔗糖占10～15g。

优选的，所述一号固体培养基和二号固体培养基均包括酵母粉、蔗糖、琼脂粉和蒸馏水，在每升蒸馏水中，酵母粉占16～21g、蔗糖占10～15g、琼脂粉占15～20g。

优选的，所述步骤S3中的浓度梯度为：10^-4、10^-5、10^-6和10^-7。

优选的，采用恒温培养箱对所述平板进行恒温培养。

优选的，所述固化实验包括以下步骤：

a、选取在所述二号液体培养基中培养1～2d的菌液后，将5ml所述菌液和10g砂土混合搅拌均匀，并制备成块状砂土试样；

b、使用地基承载力检测仪对所述块状砂土试样进行检测。