[发明专利]沙漠自源固化菌株的分离方法及其固化砂土能力验证方法

权利要求书

1.沙漠自源固化菌株的分离方法，其分离得到的沙漠自源固化菌株用于改良和固化易风化砂土，其特征在于，包括以下步骤：

S1、从内蒙古沙漠土中取地表120～150cm处的沙漠土n克，放入10n克的无菌蒸馏水中振摇15～20min后静置12h，取上清液备用；

S2、将上清液接种至一号液体培养基中，进行恒温振荡培养；

S3、按稀释的浓度梯度，将步骤S2中恒温震荡培养后的液体制备成不同浓度的稀释溶液，并将所述不同浓度的稀释溶液分别涂布于上表面具有一号固体培养基的平板上，然后进行恒温培养，培养时间1～2d，培养温度30～37℃；

S4、选取步骤S3中固体培养基上的单菌落，接种至二号液体培养基中培养，然后选取在二号液体培养基中培养1～2d的菌液进行固化实验验证；

S5、选取步骤S4中固化效果最好的单菌落继续接种至二号固体培养基中，反复划线，进行5～6次纯化培养，得到所述沙漠自源固化菌株。

2.根据权利要求1所述的沙漠自源固化菌株的分离方法，其特征在于，所述步骤S2中一号液体培养基进行恒温振荡培养的条件如下：

振荡温度30～37℃，振荡频率140～180r/min，pH为培养基自然pH，培养时长1～2d。

3.根据权利要求1所述的沙漠自源固化菌株的分离方法，其特征在于，所述一号液体培养基和二号液体培养基均包括酵母粉、蔗糖和蒸馏水，在每升蒸馏水中，酵母粉占16～21g、蔗糖占10～15g；

所述一号固体培养基和二号固体培养基均包括酵母粉、蔗糖、琼脂粉和蒸馏水，在每升蒸馏水中，酵母粉占16～21g、蔗糖占10～15g、琼脂粉占15～20g。

4.根据权利要求1所述的沙漠自源固化菌株的分离方法，其特征在于，所述步骤S3中的浓度梯度为：10^-4、10^-5、10^-6和10^-7。

5.根据权利要求1所述的沙漠自源固化菌株的分离方法，其特征在于，采用恒温培养箱对所述平板进行恒温培养。

6.根据权利要求1所述的一种沙漠自源固化菌株的分离方法，其特征在于，所述固化实验包括以下步骤：

a、选取在所述二号液体培养基中培养1～2d的菌液，将5ml所述菌液和10g砂土混合搅拌均匀，并制备成块状砂土试样；

b、使用地基承载力检测仪对所述块状砂土试样进行检测。

7.根据权利要求1所述的沙漠自源固化菌株的分离方法，其特征在于，分离得到的沙漠自源固化菌株为杆状，其平均长为1.5μm～2.5μm。

8.沙漠自源固化菌株固结砂土能力的验证方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、采用如权利要求1至7任意一项所述的沙漠自源固化菌株的分离方法，分离得到沙漠自源固化菌株，将沙漠自源固化菌株培养成沙漠自源固化菌液，所述沙漠自源固化菌液的OD600值为1.5～2.5；

2)、将沙漠自源固化菌液和砂土按照质量比(1:3)～(1:5)的比例进行混合并搅拌均匀，并制成砂土试样；

3)、再将所述砂土试样完全浸入固化营养液中，并与固化营养液充分反应5～10天；

4)、对步骤3)中反应后的砂土试样，进行无侧限抗压强度测试，从而验证沙漠自源固化菌株固结砂土的能力。

9.根据权利要求8所述的沙漠自源固化菌株固结砂土能力的验证方法，其特征在于，所述固化营养液包括酵母粉、硫酸铵、Tris和蒸馏水，在每升蒸馏水中，酵母粉占15～20g、硫酸铵占7～10g、Tris占13～18g。

10.根据权利要求8所述的沙漠自源固化菌株固结砂土能力的验证方法，其特征在于，所述砂土的粒径为0.074mm～2mm。