[发明专利]一种游离肼的检测方法及其在磷酸西格列汀原料药杂质检测中的应用

权利要求书

1.一种游离肼的检测方法，所述方法基于离子色谱法，包括：

色谱条件的建立：

色谱柱：Thermo Dionex IonPac CS12A色谱柱，250mm*4mm；

保护柱：Thermo Dionex IonPac CG12保护柱，4mm*50mm；

阳离子抑制器CERS 4mm；

检测器：电导检测器；

流动相：5mmol/l甲烷磺酸；

流速：0.8ml/min-1.3ml/min；

柱温：28℃-35℃；

进样量：25ul。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流速为1.0ml/min。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述柱温为32℃。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，还包括对照品溶液的制备，具体步骤包括：

精密量取硫酸肼适量，用超纯水或去离子水溶解并稀释成每1ml约含0.9μg游离肼的溶液，即得。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，还包括定性检测和/或定量测定，具体步骤包括：

定性检测：

在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，记录色谱图；与对照品溶液的色谱图比较，观察供试品溶液的色谱图中是否在相应的保留时间出现相应的色谱峰；

定量测定：

在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，按外标法计算供试品溶液中游离肼的含量。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法对游离肼的最低线性检出浓度为0.18μg/ml，以信噪比3:1确定的最低检出浓度为0.05μg/ml。

7.权利要求1至6中任一项所述的检测方法在磷酸西格列汀原料药杂质检测中的应用；

具体的，所述应用为利用权利要求1至6中任一项所述的检测方法，对磷酸西格列汀原料药中的游离肼进行定性检测和/或定量测定。

8.一种磷酸西格列汀原料药中游离肼的检测方法，包括色谱条件建立、对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、定性检测和/或定量测定，其中，

色谱条件的建立：

色谱柱：Thermo Dionex IonPac CS12A色谱柱，250mm*4mm；

保护柱：Thermo Dionex IonPac CG12保护柱，4mm*50mm；

阳离子抑制器CERS 4mm；

检测器：电导检测器；

流动相：5mmol/l甲烷磺酸；

流速：0.8ml/min-1.3ml/min；优选为1.0ml/min；

柱温：28℃-35℃；优选为32℃；

进样量：25ul；

对照品溶液的制备：

精密量取硫酸肼适量，用超纯水或去离子水溶解并稀释成每1ml含0.9μg游离肼的溶液，即得；

供试品溶液的制备：

取磷酸西格列汀适量，加超纯水或去离子水溶解并稀释成每1ml含60mg的溶液，即得；

定性检测：

在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，记录色谱图；与对照品溶液的色谱图比较，观察供试品溶液的色谱图中是否在相应的保留时间出现相应的色谱峰；

和/或

定量测定：

在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，按外标法计算供试品溶液中游离肼的含量。